本发明公开了利用CRISPR‑Cas9系统构建的敲除IFN‑β基因的293T细胞系。本发明所提供的敲除IFN‑β基因的293T细胞系，具体为人胚肾细胞293T‑KO‑IFN‑β，它在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.10096。实验证明，本发明所得的敲除IFN‑β基因的293T细胞系不能正确的表达IFN‑β蛋白。由于IFN‑β蛋白具有抗病毒作用，故B型流感病毒在野生型的293T细胞中不能大量的增殖。而敲除IFN‑β基因的293T细胞系由于不能正确的表达IFN‑β蛋白，故可用于B型流感病毒在该细胞系中更好的增殖，获得更大量病毒用于实验研究。