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发明公开
CN104059878A 一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方 无效 - 驳回

  • 专利标题： 一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方
  • 专利标题（英）： Method for in vitro capacitation of rabbit sperms and nutrient solution formula
  • 申请号： CN201410287368.0
    申请日： 2014-06-23
  • 公开(公告)号： CN104059878A
    公开(公告)日： 2014-09-24
  • 发明人: 李拥军 , 张光景 , 张佳慧 , 杨波 , 蔡缪荧
  • 申请人： 扬州大学
  • 申请人地址： 江苏省扬州市大学南路88号
  • 专利权人： 扬州大学
  • 当前专利权人： 扬州大学
  • 当前专利权人地址： 江苏省扬州市大学南路88号
  • 代理机构： 南京中新达专利代理有限公司
  • 代理商 孙鸥; 朱杰
  • 主分类号： C12N5/076
  • IPC分类号： C12N5/076
一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方
摘要：
本发明涉及一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方。本发明在BO获能液中添加10μmol/L EGCG，用于精子体外获能处理，且在BO获能液中添加10μmol/L EGCG，BO获能液配方为：NaCl 6.5453mg/mL，KCl 0.2997mg/mL，NaH2PO4·H2O 0.1145mg/mL，MgCl2·6H2O 0.1057mg/mL，CaCl2·2H2O 0.330mg/mL，葡萄糖2.518mg/mL，0.2％酚红4％，100IU/mL青霉素，100IU/mL链霉素，NaHCO33.1080mg/mL，丙酮酸钠0.1380mg/mL，肝素20μg/mL，BSA20mg/mL。本发明克服了现有的精子体外获能过程中，由于精子密度较大，精子自身代谢产生的氧自由基积累较多的缺陷。本发明利用成年新西兰白兔公免，对其采精后，在BO获能液中添加不同浓度EGCG(0μM、10μM、15μM、20μM、25μM)，研究其对兔精子获能效果的影响，得出最佳EGCG添加浓度，建立一种高效的兔体外获能培养体系。
摘要（英）：

The invention relates to a method for in vitro capacitation of rabbit sperms and a nutrient solution formula. In the invention, 10 mum mol/L of EGCG is added in a BO capacitation liquid for sperm in vitro capacitation treatment, and 10 mum mol/L of EGCG is added in the BO capacitation liquid, the formula of the a BO capacitation liquid comprises the following components by weight: 6.5453mg/mL of NaCl, 0.2997mg/mL of KCL, 0.1145mg/mL of NaH2PO4.H2O, 0.1057mg/mL of MgC12.6H2O, 0.330mg/mL of CaCl2.2H2O, 2.518mg/mL of glucose, 4% of 0.2% phenol red, 100IU/mL of penicillin, 100IU/mL of streptomycin, 3.1080mg/mL of NaHCO3, 0.1380mg/mL of sodium pyruvate, 20mum g/mL of heparin and 20mg/mL of BSA. The method for in vitro capacitation of rabbit sperms overcomes the defect of mass oxyradical accumulation generated by sperm metabolism due to large sperm density during a current sperm in vitro capacitation process. The method uses adult New Zealand white male rabbit, different concentration EGCG (0mumM, 10mumM, 15mumM, 20mumM and 25mumM) can be added in the BO capacitation liquid, influence of the BO capacitation liquid to the rabbit sperm capacitation effect is researched so that optimum EGCG addition concentration is obtained, and thereby a rabbit in vitro capacitation culture system with high efficiency is established.

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