本发明涉及一种酶联免疫显色底物，所述的显色底物的pH为4.0-4.5，由质量浓度为0.9-1.5g/l的一水合柠檬酸、质量浓度为25-30g/l的十二水磷酸氢二钠、质量浓度为3-3.5g/l的四甲基联苯胺盐酸盐、质量浓度为0.15-0.3g/l的乙二胺四乙酸二钠、与所述的显色底物的体积比为0.01-0.02的丙三醇、质量浓度为0.095-0.1g/l的焦磷酸钠、质量浓度为0.008-0.01g/l的锡酸钠、pH调节剂和水组成。本发明采用四甲基联苯胺盐酸盐作为显色的主要成分，可以直接在水溶液条件下完全溶解，稳定性好、无需提前混合，简化了操作步骤，减少了批间差异。