本发明公开了一种纳米金miR-375偶联物及其制备方法和应用。该偶联物包括纳米金颗粒和双链核苷酸，所述双链核苷酸为两条链均有28个碱基的双链的miR-375，或者，与双链的miR-375序列同源性在95～100%编码相同功能双链核苷酸；其中，所述双链核苷酸都含有两个茎环结构，且反义链的5’末端含有六碳烷基硫醇，并与纳米金颗粒偶联。该纳米金miR-375偶联物体外对肝癌细胞以及体内对肝癌裸鼠移植瘤都有显著的抑制生长作用，在肝癌的治疗应用方面有有益效果，将来还可应用于其他消化系统肿瘤的治疗。