本发明提供一种检测原发性高血压相关的线粒体DNAT5655C突变的试剂盒，由DNA提取混合液、PCR混合液、针对T5655C设计的外引物和内引物、限制性内切酶、阳性对照、阴性对照和盒体组成。本发明运用蛋白酶K消化裂解法，从少量的血液标本、带毛囊的毛发、口腔粘膜刮片或唾液等样本中快速提取基因组DNA，解决了传统上从原发性高血压患者血液中提取DNA的问题，减轻被检者的痛苦，实现跨地区传递样本。特异性限制性内切酶形成的不同位点，提高了酶切的特异性，设有分子内控指标，避免出现假阴性结果，提高检测稳定性，检测成本低，检测流程简便、快速，结果判读直观，适于实用。