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公开(公告)号:CN109355395B
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN201811064966.6
申请日:2018-09-13
Applicant: 黑龙江八一农垦大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686
Abstract: 本发明涉及一种用于同时检测淡水鱼中三种常见吸虫囊蚴的多重PCR检测方法,包括如下步骤:首先提取华支睾吸虫、东方次睾吸虫和H.dubinini囊蚴的DNA及设计三种吸虫的特异性引物,然后进行多重PCR反应条件的优化,最终确定最佳的PCR反应条件。按照最佳反应条件进行验证所建立方法的特异性、敏感性以及临床样品检测方法的可行性。此外,本发明还公开了用于同时检测华支睾吸虫、东方次睾吸虫和H.dubinini囊蚴的特异性引物序列。通过试验验证表明本发明所公开的引物序列可同时鉴定华支睾吸虫、东方次睾吸虫和H.dubinini,具有操作简单快速、结果直观、敏感性和特异性高及引物可灵活组合等优点。
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公开(公告)号:CN110747277A
公开(公告)日:2020-02-04
申请号:CN201911051617.5
申请日:2019-10-31
Applicant: 黑龙江八一农垦大学
IPC: C12Q1/6888 , G16B30/10 , C12N15/11 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明涉及一种后睾科吸虫核糖体内转录间隔区的通用引物,所述正向引物序列为:ACAATGACGGTTTCAGCGAGT(SEQ ID No.1),反向引物序列为:CACAAACAACCCGACTCCAAGG(SEQ ID No.2)。本发明还公开了该通用引物的设计和扩增方法以及用途。本发明的通用引物是基于核糖体内转录间隔区(ITS)两端保守的18S rDNA和28S rDNA序列设计,所得到的引物特异性极强,扩增的ITS1和ITS2进化速率相对较快,在种间存在显著的差异;将该引物用于后睾科吸虫华支睾吸虫和东方次睾吸虫的扩增,准确度高,克服了形态特征鉴定的缺陷,解决了种质混杂的问题。
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公开(公告)号:CN105801698A
公开(公告)日:2016-07-27
申请号:CN201610255695.7
申请日:2016-04-22
Applicant: 黑龙江八一农垦大学
CPC classification number: C07K16/2836 , C07K2317/10
Abstract: 本发明属于一种牛源VCAM?1多克隆抗体的制备方法及应用。该方法包括下列步骤:(1)、RNA提取;(2)、反转录PCR;(3)、引物;(4)、基因片段的扩增;(5)、基因的克隆;(6)、原核表达载体的构建;(7)、重组质粒在大肠杆菌中的表达及鉴定;(8)、重组蛋白质的纯化;(9)、蛋白印迹;(10)、重组蛋白的透析及浓度的测定;(11)、免疫抗原的制备;(12)、免疫及采血;(13)、血清的分离。本发明该多克隆抗体可用于识别牛重组VCAM?1蛋白和天然牛源VCAM?1蛋白,所述VCAM?1多克隆抗体效价高,特异性强。特别是针对牛源天然VCAM?1蛋白。
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公开(公告)号:CN104388550A
公开(公告)日:2015-03-04
申请号:CN201410605699.4
申请日:2014-11-03
Applicant: 黑龙江八一农垦大学
CPC classification number: C12Q1/6848 , C12Q2531/113
Abstract: 一种牛贝诺孢子虫病巢式PCR检测方法,涉及一种分子生物学检测方法,该方法以样品DNA为模板,利用虫体的核糖体ITS序列引物B1/B2进行第一轮PCR扩增,再以第一轮PCR产物为模板,通过设计的一对鉴别贝诺孢子虫的特异性引物B3/B4,进行第二轮PCR扩增,扩增产物进行电泳检测,如果出现393bp的特异性条带,则确定所检测的病原为贝诺孢子虫。本发明的贝病的巢式PCR检测方法,对虫体基因组DNA的检测灵敏度为24.3ag/μL,并且能克服染色镜检和常规PCR等方法的缺点,提供了一种快速、特异、灵敏的贝病的早期诊断的分子生物学方法,对该病的早期检测和有效地预防具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN207692785U
公开(公告)日:2018-08-07
申请号:CN201720761768.X
申请日:2017-06-27
Applicant: 黑龙江八一农垦大学
Abstract: 一种二氧化碳风扇捕蚊器,涉及蚊子活体样本采集装置领域,包括蚊子收集装置、蚊子盛放装置和二氧化碳生成装置,所述的蚊子收集装置、蚊子盛放装置和二氧化碳生成装置均为带有上盖的箱体结构,上盖铰接在箱体上,所述的蚊子收集装置内设置有漏斗和横管,漏斗上的侧壁上密布有用于散发二氧化碳的小孔,漏斗的下端从上侧插在横管内,横管的一端设有用于进风的风扇,三通接头上剩余的两个接口中,一个接口通过透明软管与蚊子收集装置连接,另一个接口通过透明软管与二氧化碳生成装置连接。本实用新型设计新颖,结构简单,工作时蚊子不容易飞出。同时,本实用新型不但体积小巧,而且在使用时无需外部供电,因此使用时极为方便。
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公开(公告)号:CN202766523U
公开(公告)日:2013-03-06
申请号:CN201220500978.0
申请日:2012-09-28
Applicant: 黑龙江八一农垦大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本实用新型涉及的是一种PCR低温专用加样冰盒,该冰盒包括托盒和与托盒配套使用的防护罩,所述的托盒顶部卡槽连接有加样架,加样架下端设置有横板,横板与托盒内壁周向固定,形成密闭腔室,密闭腔室内填充有制冷剂。本实用新型设置为一个固定密封的冰盒,在携带、使用、管理三大方面均体现出便捷的优势;其次,在托盒内设置带U型槽的横板,使加样过程中,PCR管处在低温状态下,同时又避免了水汽凝结的现象,保证了试验结果的准确性;再次,在托盒内加设的支撑板,进一步提高了托盒的牢固性,延长了使用寿命。
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