公开(公告)号：CN118546908A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410699702.7

申请日：2024-05-31

申请人： 青岛大学

发明人： 何宁宁 ,  李尚勇

IPC分类号： C12N9/38 ,  C12N15/70 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种具有热恢复特性的ι‑卡拉胶酶CgiS及其应用。所述ι‑卡拉胶酶CgiS氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的ι‑卡拉胶酶CgiS结构新颖，氨基酸序列与NCBI中已知序列相似度最高仅为74.03%。本发明所述的ι‑卡拉胶酶CgiS具有热恢复特性，作用方式为内切，降解主产物为ι‑卡拉四糖。本发明所述的ι‑卡拉胶酶产量高，结构新颖，性质独特，具有优良的工业化应用潜质。

公开(公告)号：CN107828809B

公开(公告)日：2021-02-12

申请号：CN201711282841.6

申请日：2017-12-07

申请人： 青岛大学

发明人： 陈雪红 ,  李尚勇 ,  韩彦弢

IPC分类号： C12N15/60 ,  C12N9/88 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/02 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种外切型寡褐藻胶裂解酶及其编码基因与应用。本发明从海洋细菌Cellulophagasp.SY116中克隆得到新的寡褐藻胶裂解酶基因OalC6，大小2,328 bp，编码775个氨基酸，属于多糖裂解酶PL‑6家族。将该基因在大肠杆菌中进行表达和纯化，得到重组OalC6，分子量大小约为85.9kDa。该酶对褐藻酸钠和褐藻寡糖具有活性，对古洛糖醛酸片段（polyG）具有偏好性。本发明的寡褐藻胶裂解酶在生产生物乙醇开发新能源方面具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN109486804B

公开(公告)日：2020-09-01

申请号：CN201811596664.3

申请日：2018-12-26

申请人： 青岛大学

发明人： 李尚勇 ,  韩彦弢 ,  周宇

IPC分类号： C12N9/88 ,  C12N15/56 ,  C12P19/26 ,  C12P19/12

摘要： 本发明涉及一种具有热恢复特性的内切型壳聚糖酶CsnM及其应用。所述壳聚糖酶CsnM氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的壳聚糖酶产量可达680.2U/mL，最适反应温度为40℃，具有热恢复特性，在煮沸10min后，在冰水中孵育30min，可恢复89.1％的活性。该酶作用方式为内切，降解主产物为壳二糖和壳三糖。本发明所述的壳聚糖酶产量大，性质新颖，具有优良的工业化应用潜质。

公开(公告)号：CN109022408B

公开(公告)日：2019-05-21

申请号：CN201811117219.4

申请日：2018-09-25

申请人： 青岛大学

发明人： 李尚勇 ,  韩彦弢 ,  王亚男

IPC分类号： C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12P19/00 ,  C12P19/12

摘要： 本发明涉及一种具有pH稳定性和热恢复特性的内切型褐藻胶裂解酶Aly08及其应用。所述褐藻胶裂解酶Aly08氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的褐藻胶裂解酶为人工设计序列，氨基酸序列与已知功能的褐藻胶裂解酶相似度仅为78%。本发明所述的褐藻胶裂解酶最适反应温度为45℃，具有热恢复特性，在煮沸5分钟后，在冰水中孵育40分钟，可恢复78.3%的活性。最适反应pH为8.3，具有宽广的pH稳定性（5‑10.6）。该酶作用方式为内切，降解主产物为不饱和褐藻胶二、三糖。本发明所述的褐藻胶裂解酶产量大，性质新颖，具有良好的工业化应用潜质。

公开(公告)号：CN113493777B

公开(公告)日：2023-11-07

申请号：CN202110714060.X

申请日：2021-06-25

申请人： 青岛大学

发明人： 何宁宁 ,  李尚勇 ,  宋静宜

IPC分类号： C12N9/38 ,  C12P19/00 ,  C12P19/14

摘要： 本发明涉及一种β‑半乳糖苷酶及其在乳糖降解中的应用。所述β‑半乳糖苷酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的β‑半乳糖苷酶Gal39为结构与功能新颖的乳糖水解酶，其氨基酸序列与已有性质报道的β‑半乳糖苷酶序列相似度仅为79.28％，是一个新酶。本发明所述的β‑半乳糖苷酶产量可达366.2U/mL,最适反应温度为40℃，最适反应PH为7.5。本发明所述的β‑半乳糖苷酶具有耐热性，在60℃下孵育1小时仍保持56.2％的酶活性。本发明所述的β‑半乳糖苷酶产量大，稳定性好，具有优良的工业化应用潜质。

公开(公告)号：CN109735520B

公开(公告)日：2020-06-05

申请号：CN201811596818.9

申请日：2018-12-26

申请人： 青岛大学

发明人： 于惠青 ,  李尚勇

IPC分类号： C12N9/38 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00

摘要： 本发明涉及一种具有热稳定特性的ι‑卡拉胶酶CgiV及其应用。本发明提供的ι‑卡拉胶酶基因来源于海洋细菌Vibrio sp.SY01，菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC No：M2018769。所述ι‑卡拉胶酶CgiV的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。氨基酸序列与已知功能的ι‑卡拉胶酶相似度仅为88％。本发明所述的ι‑卡拉胶酶为重组表达工程菌株纯化所得，具有热稳定特性，在40℃的活性半衰期长达6.5h，30℃的活性半衰期长达42h，具备工业化应用潜质。

公开(公告)号：CN109320630B

公开(公告)日：2019-12-20

申请号：CN201811329059.X

申请日：2018-11-09

申请人： 青岛大学

发明人： 李尚勇

IPC分类号： C08B37/12 ,  C12N9/24

摘要： 本发明涉及一种新型仿生亲和纯化材料及其在壳聚糖酶纯化中的应用，属于工业生物技术领域。本发明所述仿生亲和材料的亲和配基为壳二糖，连接臂为氰尿酰氯，基础介质为活化的琼脂糖6B。所述仿生亲和材料的解离常数(Kd)及最大结合能力(Qmax)分别为24.2μg/mL和24.1mg/g。利用上述仿生亲和材料建立了一种壳聚糖酶仿生亲和纯化方法，可高效率、低成本的生产高纯度壳聚糖酶，具有良好的工业化应用潜质。

公开(公告)号：CN109762799A

公开(公告)日：2019-05-17

申请号：CN201811596638.0

申请日：2018-12-26

申请人： 青岛大学

发明人： 于惠青 ,  李尚勇

IPC分类号： C12N9/38 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00

摘要： 本发明涉及一种具有热恢复特性的内切型κ-卡拉胶酶CgkA及其应用。本发明提供的κ-卡拉胶酶基因来源于海洋细菌Vibrio sp.SY01，菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC No：M2018769。所述κ-卡拉胶酶CgkA的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。氨基酸序列与已知功能的κ-卡拉胶酶相似度仅为87％。本发明所述的κ-卡拉胶酶为重组表达工程菌株纯化所得，具有热恢复特性，酶液煮沸5分钟后，在冰水中(0℃)放置30分钟，可恢复其58.4％的活性。本发明所述的κ-卡拉胶酶具有良好的理化性质，具备工业化应用潜质。

公开(公告)号：CN107828809A

公开(公告)日：2018-03-23

申请号：CN201711282841.6

申请日：2017-12-07

申请人： 青岛大学

发明人： 陈雪红 ,  李尚勇 ,  韩彦弢

IPC分类号： C12N15/60 ,  C12N9/88 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/02 ,  C12R1/19

CPC分类号： C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12P19/02 ,  C12Y402/02

摘要： 本发明公开了一种外切型寡褐藻胶裂解酶及其编码基因与应用。本发明从海洋细菌Cellulophagasp.SY116中克隆得到新的寡褐藻胶裂解酶基因OalC6，大小2,328 bp，编码775个氨基酸，属于多糖裂解酶PL-6家族。将该基因在大肠杆菌中进行表达和纯化，得到重组OalC6，分子量大小约为85.9kDa。该酶对褐藻酸钠和褐藻寡糖具有活性，对古洛糖醛酸片段（polyG）具有偏好性。本发明的寡褐藻胶裂解酶在生产生物乙醇开发新能源方面具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN113493781A

公开(公告)日：2021-10-12

申请号：CN202110714063.3

申请日：2021-06-25

申请人： 青岛大学

发明人： 何宁宁 ,  李尚勇 ,  宋静宜

IPC分类号： C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12P19/26 ,  C12P19/12

摘要： 本发明公开了一种壳聚糖酶CsnH的编码基因及其应用。本发明所述壳聚糖酶CsnH的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。与已有性质报道的壳聚糖酶序列相似度仅为67.64％。在大肠杆菌中重组表达后，壳聚糖酶产量可达665.3U/mL，本发明所述壳聚糖酶CsnH的最适反应温度为70℃，具有耐高温的特性，在80℃高温下孵育1小时仍能保持30.25％的活性，作用方式为内切，降解产物为壳二糖。可广泛应用于食品、养殖以及医药保健等行业。