公开(公告)号：CN119223711A

公开(公告)日：2024-12-31

申请号：CN202411745668.9

申请日：2024-12-02

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 周敏 ,  章晋勇 ,  薛思佳 ,  信召哲 ,  孟丽慧

IPC: G01N1/30 ,  G01N1/28 ,  G01N21/64 ,  G01N21/84

Abstract: 本发明属于荧光染色技术领域，具体涉及一种实时示踪胞内微孢子虫增殖发育的荧光标记方法。该方法包括如下步骤：使用亲脂性碳菁类染料配制的染色液对微孢子虫的成熟孢子进行染色；将微孢子虫的成熟孢子接种至正在培养的宿主细胞中进行感染，获得活细胞样品；在感染后的5小时~120小时，使用激光共聚焦显微镜对所述活细胞样品进行观察。本发明提供的该方法解决了基于转基因技术示踪微孢子虫侵染与胞内发育过程的难题，填补了实时示踪微孢子虫胞内增殖发育全过程的空缺，替代了传统基于细胞固定和通透的双色或多色荧光染色步骤标记不同增殖时期微孢子虫的复杂方法，操作简单，便于观察，适用所有属种微孢子虫。

公开(公告)号：CN119223711B

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411745668.9

申请日：2024-12-02

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 周敏 ,  章晋勇 ,  薛思佳 ,  信召哲 ,  孟丽慧

IPC: G01N1/30 ,  G01N1/28 ,  G01N21/64 ,  G01N21/84

Abstract: 本发明属于荧光染色技术领域，具体涉及一种实时示踪胞内微孢子虫增殖发育的荧光标记方法。该方法包括如下步骤：使用亲脂性碳菁类染料配制的染色液对微孢子虫的成熟孢子进行染色；将微孢子虫的成熟孢子接种至正在培养的宿主细胞中进行感染，获得活细胞样品；在感染后的5小时~120小时，使用激光共聚焦显微镜对所述活细胞样品进行观察。本发明提供的该方法解决了基于转基因技术示踪微孢子虫侵染与胞内发育过程的难题，填补了实时示踪微孢子虫胞内增殖发育全过程的空缺，替代了传统基于细胞固定和通透的双色或多色荧光染色步骤标记不同增殖时期微孢子虫的复杂方法，操作简单，便于观察，适用所有属种微孢子虫。