公开(公告)号：CN119552965A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411668980.2

申请日：2024-11-21

Applicant: 重庆大学附属肿瘤医院

Inventor： 李丽仙 ,  高余翟 ,  林红 ,  陈万一 ,  唐甜甜 ,  黄雨欣 ,  刘洋 ,  时春节 ,  秦晚霞

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明提供了一种具有调控三阴性乳腺癌circMKLN1环状RNA的筛选及验证方法，circMKLN1是由MKLN1基因的4‑7外显子转录并反向剪接环化形成，其长度为535bp。利用circMKLN1的引物进行PCR扩增后送生工生物公司进行Sanger测序，结果发现了circMKLN1的特异性剪接位点。以cDNA和gDNA为模板，用circMKLN1的收敛引物和发散引物进行PCR扩增，结果发现circMKLN1的发散引物只能在cDNA中被扩增，而在gDNA中没有扩增，进一步证明了circMKLN1的存在。RNase R和放线菌素D实验显示，circMKLN1对RNase R具有更高的抗性，circMKLN1的半衰期远长于线性MKLN1mRNA的半衰期。核质分离实验表明circMKLN1主要存在于细胞质中。