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公开(公告)号:CN101384729A
公开(公告)日:2009-03-11
申请号:CN200480003559.4
申请日:2004-02-05
Applicant: 通用电气医疗集团生物科学公司
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6858 , C12Q1/6874 , C12Q2565/537 , C12Q2535/125 , C12Q2521/525 , C12Q2525/101
Abstract: 本发明公开了对样品中的核酸进行测序的方法,该方法基于使用末端-磷酸根-标记的核苷酸作为对于核酸聚合酶的底物。本发明的方法使用核苷多磷酸酯、二脱氧核苷多磷酸酯或脱氧核苷多磷酸酯类似物,它们具有连接到末端-磷酸根上的生色染料、化学发光或荧光部分、质量标记或电化学标记。当核酸聚合酶使用这种类似物作为底物时,酶-活化的标记将存在于磷酰基转移的无机多磷酸酯副产品上,通过磷酸酯酶切割磷酰基转移的多磷酸酯产品导致在其上连接的标记中的可测定的变化,在某些情况下标记的多磷酸酯可以通过标记而直接被测定,并且提供了关于核酸的信息。当聚合酶试验在磷酸酯酶存在下进行时,提供了方便的实时监测DNA或RNA合成和表征靶核酸的方法。
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公开(公告)号:CN1973048A
公开(公告)日:2007-05-30
申请号:CN200480003557.5
申请日:2004-01-30
Applicant: 通用电气医疗集团生物科学公司
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6823 , C07H19/10 , C07H19/20 , C07H21/00 , C12Q1/6816 , C12Q1/6851 , C12Q2521/525
Abstract: 本发明涉及使用标记的底物或底物类似物测定靶的改进方法,所述方法包括在酶-催化的反应中使所述底物或底物类似物进行反应,仅当底物或底物类似物反应时,产生带有独立地可测定信号的标记部分。本发明特别公开了测定样品中核酸的方法,所述方法基于使用末端-磷酸根-标记的核苷酸作为核酸聚合酶的底物。本发明方法使用核苷多磷酸酯、二脱氧核苷多磷酸酯或脱氧核苷多磷酸酯类似物,它们具有连接于末端磷酸根上的生色染料、化学发光或荧光部分、质量标记或电化学标记。当核酸聚合酶使用这些类似物作为底物时,酶-活化的标记将存在于磷酰基转移的无机多磷酸酯副产品中,磷酰基转移的多磷酸酯产品通过磷酸酯酶的断裂导致其上连接的标记中的可测定变化,当聚合酶试验在磷酸酯酶存在下进行时,提供了实时监测RNA或DNA合成和测定靶核酸的方便的方法。
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公开(公告)号:CN1973048B
公开(公告)日:2015-06-03
申请号:CN200480003557.5
申请日:2004-01-30
Applicant: 通用电气医疗集团生物科学公司
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6823 , C07H19/10 , C07H19/20 , C07H21/00 , C12Q1/6816 , C12Q1/6851 , C12Q2521/525
Abstract: 本发明涉及使用标记的底物或底物类似物测定靶的改进方法,所述方法包括在酶-催化的反应中使所述底物或底物类似物进行反应,仅当底物或底物类似物反应时,产生带有独立地可测定信号的标记部分。本发明特别公开了测定样品中核酸的方法,所述方法基于使用末端-磷酸根-标记的核苷酸作为核酸聚合酶的底物。本发明方法使用核苷多磷酸酯、二脱氧核苷多磷酸酯或脱氧核苷多磷酸酯类似物,它们具有连接于末端磷酸根上的生色染料、化学发光或荧光部分、质量标记或电化学标记。当核酸聚合酶使用这些类似物作为底物时,酶-活化的标记将存在于磷酰基转移的无机多磷酸酯副产品中,磷酰基转移的多磷酸酯产品通过磷酸酯酶的断裂导致其上连接的标记中的可测定变化,当聚合酶试验在磷酸酯酶存在下进行时,提供了实时监测RNA或DNA合成和测定靶核酸的方便的方法。
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公开(公告)号:CN101384729B
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN200480003559.4
申请日:2004-02-05
Applicant: 通用电气医疗集团生物科学公司
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6858 , C12Q1/6874 , C12Q2565/537 , C12Q2535/125 , C12Q2521/525 , C12Q2525/101
Abstract: 本发明公开了对样品中的核酸进行测序的方法,该方法基于使用末端-磷酸根-标记的核苷酸作为对于核酸聚合酶的底物。本发明的方法使用核苷多磷酸酯、二脱氧核苷多磷酸酯或脱氧核苷多磷酸酯类似物,它们具有连接到末端-磷酸根上的生色染料、化学发光或荧光部分、质量标记或电化学标记。当核酸聚合酶使用这种类似物作为底物时,酶-活化的标记将存在于磷酰基转移的无机多磷酸酯副产品上,通过磷酸酯酶切割磷酰基转移的多磷酸酯产品导致在其上连接的标记中的可测定的变化,在某些情况下标记的多磷酸酯可以通过标记而直接被测定,并且提供了关于核酸的信息。当聚合酶试验在磷酸酯酶存在下进行时,提供了方便的实时监测DNA或RNA合成和表征靶核酸的方法。
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