基于DNAzyme催化介导恒温扩增技术的RNA甲基化修饰检测方法

    公开(公告)号:CN117089604A

    公开(公告)日:2023-11-21

    申请号:CN202310770785.X

    申请日:2023-06-28

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于DNAzyme催化介导恒温扩增技术的RNA甲基化修饰检测方法,包括如下步骤:分别设计并合成rAG底物、rm6AG底物、8‑17DNAzyme、发夹探针H1、发夹探针H2;配制一系列含有由不同比例的混合底物的混合溶液,将每种比例的混合溶液与DNAzyme反应液混合,得到标准品溶液;配制含rAG底物的溶液,不加入DNAzyme反应液,作为空白对照溶液;将标准品溶液进行切割反应、CHA扩增反应;将空白对照溶液进行CHA扩增反应;计算荧光强度差值,建立标准曲线;将该标准曲线用于检测待测样品的甲基化修饰水平。本发明可在温和条件下实现甲基化修饰的简单、快速、灵敏检测。

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