公开(公告)号：CN111518744A

公开(公告)日：2020-08-11

申请号：CN202010341353.3

申请日：2020-04-27

申请人： 西安交通大学医学院第一附属医院

发明人： 吕毅 ,  李青山 ,  任冯刚 ,  陈雪 ,  张雨驰 ,  畅朋康 ,  陈伯文 ,  王博 ,  吴荣谦 ,  马锋

IPC分类号： C12N5/071 ,  A61L27/36

摘要： 本发明涉及一种基于不可逆电穿孔技术的肝脏脱细胞支架构建方法。该方法包括以下步骤：1.1)大鼠称重，以异氟烷进行气体吸入麻醉并维持，麻醉生效后，SD大鼠仰卧位，用75％酒精消毒腹部皮肤，分层开腹暴露肝脏；1.2)应用卡钳式电极夹起大鼠肝脏左外叶区域，给予高压脉冲电场处理；1.3)不可逆电穿孔处理结束后，经大鼠门静脉进行插管，用肝素化PBS液进行灌注，同时剪开肝下下腔静脉，见肝脏充盈且颜色逐渐变浅，逐渐游离肝脏周围组织及韧带，取下肝脏浸入肝素化PBS液中；1.4)将取下的肝脏放入洁净容器内，用去离子水进行单向灌注；1.5)去离子水灌注结束后，PBS单向灌注30min，完成支架制备。本发明能在不应用有害化学制剂的情况下，有效提升体外脱细胞支架的构建效率。