公开(公告)号：CN118406656A

公开(公告)日：2024-07-30

申请号：CN202410626008.2

申请日：2024-05-20

Applicant: 西安交通大学

Inventor： 郭燕 ,  张慧 ,  王晨 ,  杨铁林 ,  安珂

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  C07K14/475 ,  C12N15/867 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种Wnt‑3a和R‑spondin1共表达细胞株的构建方法和应用，属于分子生物技术技术领域。通过构建同时搭载有人Wnt‑3a和R‑spondin1两个基因的多顺反子表达质粒pCDH‑puromycin‑Wnt3a‑Rspon1，通过慢病毒包装并感染293T细胞，得到Wnt‑3a和R‑spondin1共表达细胞株。通过将该细胞株在growth media中培养至75％时传代，传代后再次生长到75％时，将growth media更换为harvest media继续培养，一周后收集培养基上清，过滤，得到条件培养基。该条件培养基在培养需要Wnt‑3a和R‑spondin1两种生长因子的类器官时，具有价格低廉、添加量少、操作简单以及能稳定培类器官的优势。