公开(公告)号：CN114540341A

公开(公告)日：2022-05-27

申请号：CN202210033141.8

申请日：2022-01-12

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 龚春梅 ,  李佳阳 ,  任洁洁 ,  珠拉太 ,  周文菲 ,  唐磊 ,  余有本 ,  白娟 ,  周杰 ,  王文钊

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种快速高效的DNA5’侧翼序列克隆方法，包括以下2个主要步骤：(1)待测样本为模板，通过不同LAD引物组合与基因特异性R引物配对，使用热不对称交错PCR的方法进行第一轮PCR扩增；(2)以不同稀释倍数的第一轮PCR扩增产物作为模板，结合巢式PCR的引物设计方法，使用通用引物AC1与设计在第1轮特异性R引物上游的不同基因特异性R引物配对，通过热不对称交错PCR的方法进行第二轮PCR扩增。配合判断方法能够快速鉴别正确扩增条带范围，在原HiTail‑PCR的基础上由3轮扩增缩减为2轮扩增，且可由特异引物之间的已知间隔距离快速锁定特异扩增并排除部分非特异扩增，大幅减少非特异扩增带来的干扰。

公开(公告)号：CN114540341B

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202210033141.8

申请日：2022-01-12

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 龚春梅 ,  李佳阳 ,  任洁洁 ,  珠拉太 ,  周文菲 ,  唐磊 ,  余有本 ,  白娟 ,  周杰 ,  王文钊

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种快速高效的DNA5’侧翼序列克隆方法，包括以下2个主要步骤：(1)待测样本为模板，通过不同LAD引物组合与基因特异性R引物配对，使用热不对称交错PCR的方法进行第一轮PCR扩增；(2)以不同稀释倍数的第一轮PCR扩增产物作为模板，结合巢式PCR的引物设计方法，使用通用引物AC1与设计在第1轮特异性R引物上游的不同基因特异性R引物配对，通过热不对称交错PCR的方法进行第二轮PCR扩增。配合判断方法能够快速鉴别正确扩增条带范围，在原HiTail‑PCR的基础上由3轮扩增缩减为2轮扩增，且可由特异引物之间的已知间隔距离快速锁定特异扩增并排除部分非特异扩增，大幅减少非特异扩增带来的干扰。

公开(公告)号：CN115728118A

公开(公告)日：2023-03-03

申请号：CN202211558778.5

申请日：2022-12-06

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 龚春梅 ,  李佳阳 ,  任洁洁 ,  类兴宇 ,  珠拉太 ,  白娟 ,  张锐 ,  敬栋

IPC: G01N1/30 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种植物组织切片复染方法，涉及生物技术领域。包括以下步骤：(1)准备植物组织切片；(2)对植物组织切片进行木质素自发荧光的观察；(3)将步骤(2)观察结束后的植物组织切片进行纤维素的荧光染色观察；(4)将步骤(3)观察结束后的植物组织切片使用明场染料进行染色观察。本发明根据染料本身是否可洗除的特点进行合理排序使用，通过对同一样本的多次染色，简便快捷的同时避免了由样本的不同带来的误差干扰。