公开(公告)号：CN109679995A

公开(公告)日：2019-04-26

申请号：CN201811547741.6

申请日：2018-12-18

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 李佩韦 ,  张薇依 ,  昝林森

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12

CPC classification number: C12N15/85 ,  C07K14/47 ,  C12N2800/107

Abstract: 本发明涉及一种牛PLIN2互作蛋白双分子荧光互补载体的构建方法，以牛PLIN2的CDs区全长氨基酸序列，通过设计PLIN2在双分子荧光互补VN-173载体上的引物，与pBiFC-VN173载体重组来构建目的蛋白表达载体，酶切位点选择EcoRI和XbaI酶切，反应温度为37℃，并在EcoRI位点后增加一个碱基A，防止移码突变，最终得到牛PLIN2互作蛋白双分子荧光互补载体pBiFC-VN173-PLIN2。与现有研究蛋白互作方法相比，可以更高效表达并避免假阴性结果的存在。同时，也为进一步研究及构建蛋白互作网络及提高蛋白互作理论的完整性提供一定的试验验证手段。