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公开(公告)号：CN118028364A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410266951.7
申请日：2024-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClCKI1创制二倍体无籽西瓜的方法，属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClCKI1创制二倍体无籽西瓜的方法，首次利用CRISPR/Cas9技术，对西瓜ClCKI1基因进行靶向编辑，使其基因功能缺失，雌配子不育，自交授粉果实正常膨大，双受精无法形成合子，种子败育，只有少量白壳种子产生，从而创制二倍体无籽西瓜。通过本发明方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比，除了雌配子不育，营养生长阶段和雄配子均无明显表型变化。该方法具有简单易行、效率高、成本低和周期短等优点。
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公开(公告)号：CN116083399A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211222430.9
申请日：2022-10-08
Applicant: 西北农林科技大学 , 洛阳市农发农业科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种提高遗传转化效率的Cas9基因启动子、编辑载体、构建方法和应用，属于基因编辑领域，针对CRISPR/Cas9载体的T‑DNA插入片段表达活性进行优化，降低了转基因沉默的概率，提高了西瓜中的遗传转化效率和基因编辑效率。所述编辑载体在pBSE402的基础上，对Cas9基因进行西瓜密码子优化后，以西瓜内源泛素基因的启动子去驱动Cas9基因的表达，行成新型CRISPR/Cas9基因编辑载体pBUE702C，将西瓜的遗传转化效率从1.20％提高到10.41％，同时基因编辑效率也从53.88％提高到68.11％，该载体在提高了遗传转化效率的同时，还增加了基因编辑效率，对未来加快西瓜的基因功能研究和分子育种技术具有重要意义。
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公开(公告)号：CN118374544A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410266946.6
申请日：2024-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClSPO11‑2创制二倍体无籽西瓜的方法，属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClSPO11‑2创制二倍体无籽西瓜的方法，首次利用CRISPR/Cas9技术，对西瓜ClSPO11‑2基因进行靶向编辑，减数分裂无法配对联会，雌雄配子不育，使其基因功能缺失，双受精后种子败育，从而在二倍体水平创制无籽西瓜。通过本方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比，除了雌雄配子不育，营养生长阶段表型均无发生明显变化，无籽表型可以通过Clspo11‑2/ClSPO11‑2杂合编辑的植株无限繁殖。该方法具有简单易操作、效率高、成本低和周期短等优点。
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公开(公告)号：CN118360324A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410267052.9
申请日：2024-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClHAP2创制二倍体无籽西瓜的方法，属于植物基因工程育种技术领域。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术，对西瓜ClHAP2基因进行靶向编辑，使其基因功能缺失，精卵细胞无法正常融合导致种子败育，从而在二倍体水平创制无籽西瓜。通过本方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比，除了雌雄配子不育，营养生长阶段表型均无发生明显变化，植株可以通过自交偶尔产生的种子或Clhap2/ClHAP2杂合编辑植株无限繁殖。该方法仅利用突变体花粉给不同西瓜种质授粉就可在当代获得无籽西瓜，具有简单易操作、效率高、成本低和周期短等优点。
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公开(公告)号：CN118207250A
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202410267049.7
申请日：2024-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClSPL创制二倍体无籽西瓜的方法，属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClSPL创制二倍体无籽西瓜的方法，首次利用CRISPR/Cas9技术，对西瓜ClSPL基因进行靶向编辑，使其孢子母细胞无法分化，基因功能缺失，雌雄配子不育，双受精失败，无种子产生，从而创制二倍体无籽西瓜。通过本发明方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比，除了雌雄配子不育，营养生长阶段均无明显表型变化，无籽表型可以通过ClsplRF/ClSPLRF杂合编辑的植株无限繁殖。该方法具有简单易行、效率高、成本低和周期短等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118147223A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410453221.8
申请日：2024-04-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClMS188创制西瓜雄性不育种质的方法，属于植物基因工程技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClMS188创制西瓜雄性不育种质的方法，通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对西瓜ClMS188进行基因编辑，使该基因功能缺失，从而产生隐性细胞核雄性不育的表型。通过本发明方法创制的西瓜雄性不育系与正常的材料相比，除了雄花育性发生改变外，其他组织如根、茎、叶、卷须、雌花、果实、种子、生长势等都无可见表型变化。如果将创制的雄性不育新种质用于杂交种子生产将大幅度降低人工成本，提高制种效率，具有重要的生产应用潜力。
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公开(公告)号：CN120041498A
公开(公告)日：2025-05-27
申请号：CN202510086241.0
申请日：2025-01-20
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种利用种子荧光快速鉴定转基因西瓜的方法。本发明提供一种利用种子荧光快速鉴定转基因西瓜的方法，包括：(1)以拟南芥基因组为模板，克隆At2s3基因启动子；(2)克隆DsRed片段；(3)通过同源重组将At2s3::DsRed基因片段克隆到线性化的pCambia1300载体中，得到pCambia1300‑At2s3::DsRed重组载体；(4)将所述重组载体转入大肠杆菌DH5α，选择正确的质粒导入农杆菌，选择正确的农杆菌侵染西瓜，得到转基因西瓜种子，转基因西瓜种子能够观察到红色。本发明对于西瓜转基因的研究提供了极大的便利。
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公开(公告)号：CN120041448A
公开(公告)日：2025-05-27
申请号：CN202510086245.9
申请日：2025-01-20
Applicant: 西北农林科技大学 , 陕西东圣种业有限责任公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , C12N15/65 , A01H5/10 , A01H6/34
Abstract: 本发明公开了一种西瓜种子特异启动子Cl2s3及其应用，属于基因工程技术领域。本发明以pCambia1300为重组载体，利用西瓜种子特异启动子Cl2s3驱动红色荧光标签的系统，通过农杆菌介导的遗传转化技术，实现了荧光系统在西瓜中的整合与表达，使得转基因西瓜在种子阶段就能通过颜色变化与非转基因西瓜进行直观且有效的区分。在自然光下，非转基因西瓜种子呈白色，转基因西瓜种子呈红色；在440~460nm激发光下，转基因西瓜种子具有红色荧光。相较于传统的检测方法，可不借助特种设备和其它试剂，直接通过裸眼将转基因和非转基因种子区分开，不仅避免了抗生素所带来的各种风险，还节约了时间和研究成本。
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公开(公告)号：CN118028364B
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202410266951.7
申请日：2024-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClCKI1创制二倍体无籽西瓜的方法，属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClCKI1创制二倍体无籽西瓜的方法，首次利用CRISPR/Cas9技术，对西瓜ClCKI1基因进行靶向编辑，使其基因功能缺失，雌配子不育，自交授粉果实正常膨大，双受精无法形成合子，种子败育，只有少量白壳种子产生，从而创制二倍体无籽西瓜。通过本发明方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比，除了雌配子不育，营养生长阶段和雄配子均无明显表型变化。该方法具有简单易行、效率高、成本低和周期短等优点。
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公开(公告)号：CN118374544B
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202410266946.6
申请日：2024-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClSPO11‑2创制二倍体无籽西瓜的方法，属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClSPO11‑2创制二倍体无籽西瓜的方法，首次利用CRISPR/Cas9技术，对西瓜ClSPO11‑2基因进行靶向编辑，减数分裂无法配对联会，雌雄配子不育，使其基因功能缺失，双受精后种子败育，从而在二倍体水平创制无籽西瓜。通过本方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比，除了雌雄配子不育，营养生长阶段表型均无发生明显变化，无籽表型可以通过Clspo11‑2/ClSPO11‑2杂合编辑的植株无限繁殖。该方法具有简单易操作、效率高、成本低和周期短等优点。
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