一种丹参原生质体的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN103834611A

    公开(公告)日:2014-06-04

    申请号:CN201410046870.2

    申请日:2014-02-11

    Abstract: 本发明公开了一种丹参原生质体的分离纯化方法,包括诱导愈伤组织及继代培养、原生质体的分离和原生质体纯化三个步骤。丹参悬浮培养细胞原生质体的提取条件为:悬浮培养细胞酶解的适宜酶液组合为纤维素酶1.5%、果胶酶0.3%,离析酶0.5%;适宜的甘露醇浓度为0.4M;提取时间为12h;600r/min离心5min收集,纯化后得到原生质体的产量为1.1×106/gFW,FDA检测显示其活力为95%以上,钙离子荧光探针fluo-3/AM可成功装载到原生质体中。在该方法条件下提取的原生质体完全能够满足后续以单个细胞为研究对象的一系列研究。

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