公开(公告)号：CN116790486A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310979282.3

申请日：2023-08-05

申请人： 蚌埠医学院第一附属医院(蚌埠医学院附属肿瘤医院)

发明人： 耿志军 ,  宋雪 ,  李静 ,  许轶博 ,  孙洋 ,  张小凤 ,  左芦根 ,  王炼 ,  王月月 ,  赵天豪 ,  杨晶晶 ,  殷丽霞

IPC分类号： C12N5/077

摘要： 一种脂肪类器官培养方法，包括以下步骤：用含有4％青链霉素的Hanks缓冲液清洗脂肪组织，剔除红色血管和白色纤维组织，剪碎组织呈大小约为1mm3的脂肪块；将封口膜放入模具中按压，在封口膜上形成若干圆底的凹槽孔，并加入20μL基质胶；在每个凹槽孔内的基质胶中加入1～3个脂肪块，置于37℃的培养箱中静置1h，待基质胶凝固后取出，放入含有22mL脂肪培养基的6孔板中，放入培养箱中进行培养，该方法制备出的脂肪类器官重现了脂肪器官的一些关键细胞类型和结构特征，为后续脂肪组织的研究提供了基础，而且方法本身步骤简单，易操作。

公开(公告)号：CN116875540A

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202310979286.1

申请日：2023-08-05

申请人： 蚌埠医学院第一附属医院(蚌埠医学院附属肿瘤医院)

发明人： 李静 ,  耿志军 ,  宋雪 ,  左芦根 ,  许轶博 ,  孙洋 ,  赵天豪 ,  杨晶晶 ,  殷丽霞 ,  张小凤 ,  王炼 ,  王月月

IPC分类号： C12N5/077

摘要： 一种原代脂肪细胞的培养方法，包括以下步骤：将封口膜裁剪为直径为55mm的圆形，酒精浸泡24h后烘干；新鲜脂肪细胞用含有4％青链霉素的Hanks缓冲液清洗并剪碎组织呈稀糊状，加入消化酶缓冲液消化组织，离心后将上层油脂用移液枪弃去，脂肪层加入无菌Hanks液清洗离心并弃去上层油脂，收集脂肪细胞原液离心后，除净上层油脂；将脂肪细胞滴加到制备后的封口膜上静置30min；向6孔板中加入脂肪培养基，将脂肪细胞静置后的封口膜倒置于6孔板中，将6孔板置于37℃、CO2浓度5％的培养箱中培养。该方法以封口膜为固相载体，将脂肪细胞悬浮于培养基中生长。节约了脂肪细胞培养基和胎牛血清的用量。

公开(公告)号：CN115125196A

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202211019951.4

申请日：2022-08-24

申请人： 蚌埠医学院第一附属医院(蚌埠医学院附属肿瘤医院)

发明人： 胡建国 ,  耿志军 ,  刘全丽 ,  赵天豪 ,  黄菊 ,  李晴晴 ,  许轶博 ,  张乐乐 ,  李静 ,  左芦根 ,  宋雪 ,  张小凤 ,  王月月 ,  王炼

IPC分类号： C12N5/077 ,  C12N5/0775

摘要： 本发明一种脂肪干细胞成脂诱导分化方法，它包括以下步骤：1）取新鲜脂肪组织，2）剪碎组织，3）消化组织，4）分离出脂肪干细胞层，5）培养皿中进行培养，6）脂肪组织诱导，7）更换培养基，8）维持培养基两天换液一次，持续10‑14天后取出细胞，经过油红o染色鉴定，成功诱导脂肪干细胞变为脂肪细胞。本发明使用较少的诱导剂，不存在试剂污染，并且能缩短诱导周期，加快实验进程，更好满足实验需求。