公开(公告)号：CN110499294A

公开(公告)日：2019-11-26

申请号：CN201910724265.9

申请日：2019-08-07

Applicant: 苏州大学附属第二医院

Inventor： 董军 ,  王海洋 ,  施佳 ,  刘亮 ,  姜倩倩 ,  黄强

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  G01N21/64 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了双色荧光示踪胶质瘤干细胞微环境模型的制备方法。该制备方法包括体外培养GSCs；将具有嘌呤霉素抗性的慢病毒转染红色荧光蛋白(RFP)基因于GSCs；将稳定表达RFP的GSCs接种至全身表达绿色荧光蛋白(GFP)balb/c裸小鼠体内，构建双色荧光示踪异种移植瘤模型；将稳定表达RFP的GSCs与全身表达绿色荧光蛋白(GFP)balb/c裸小鼠骨髓细胞体外共培养，构建双色荧光示踪体外细胞共培养模型；荧光共聚焦显微镜下观察两种荧光细胞的相互作用。本发明具有通过两种荧光分别标记胶质瘤干细胞与微环境中间质细胞，使二者在细胞层面上的相互作用，在荧光显微镜下可见，为体内体外肿瘤微环境的研究提供了一种有效的研究方法的效果。

公开(公告)号：CN109943531A

公开(公告)日：2019-06-28

申请号：CN201910216211.1

申请日：2019-03-21

Applicant: 苏州大学附属第二医院

Inventor： 董军 ,  施佳 ,  王海洋 ,  代兴亮

IPC: C12N5/095

Abstract: 本发明提供一种胶质母细胞瘤干细胞的原代培养方法，所述方法包括以下步骤：GSCs原代培养、GSCs传代培养、GSCs冻存。本方法利用GSCs悬浮、成球性生长的特点，通过显微镜下挑选单个细胞克隆化培养。所获得的细胞表达不同干细胞标记物；加血清诱导分化后细胞呈贴壁生长，分化成不同类型细胞，分别表达神经胶质细胞标记物GFAP、神经元标记物βIII-Tubulin、少突胶质细胞标记物MBP。证实此法可获得不同特征的GSCs，为体外基础实验提供工具细胞。