公开(公告)号：CN104388392B

公开(公告)日：2017-07-18

申请号：CN201410597603.4

申请日：2014-10-30

Applicant: 苏州大学

Inventor： 吴康 ,  宋学宏 ,  杨彩根 ,  徐逍

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/44 ,  C07K16/06 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种恩诺沙星单克隆抗体及其制备方法和应用。具体说明，本发明以恩诺沙星及其与阳离子化牛血清白蛋白的偶联物同时作免疫原和包被抗原，建立间接棋盘ELISA法以标定合适包被抗原浓度和抗血清工作浓度，再经间接竞争ELISA 分析待测一抗对恩诺沙星标样的亲和力，以抗血清工作浓度大于1:50000且半抑制浓度IC50不大于5ng/ml作为指标遴选候选鼠，采用细胞融合技术并经严格筛选制得杂交瘤细胞株14H4A1和14F8B1，二株细胞诱生腹水，进而获得目标单抗。本发明提供的具有高滴度及高亲和力的恩诺沙星单克隆抗体，实现了恩诺沙星极微量残留的实际检测，为实现现场高效快速检测提供了技术支撑与物质基础。

公开(公告)号：CN104388392A

公开(公告)日：2015-03-04

申请号：CN201410597603.4

申请日：2014-10-30

Applicant: 苏州大学

Inventor： 吴康 ,  宋学宏 ,  杨彩根 ,  徐逍

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/44 ,  C07K16/06 ,  G01N33/577 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种恩诺沙星单克隆抗体及其制备方法和应用。具体说明，本发明以恩诺沙星及其与阳离子化牛血清白蛋白的偶联物同时作免疫原和包被抗原，建立间接棋盘ELISA法以标定合适包被抗原浓度和抗血清工作浓度，再经间接竞争ELISA分析待测一抗对恩诺沙星标样的亲和力，以抗血清工作浓度大于1∶50000且半抑制浓度IC50不大于5ng/ml作为指标遴选候选鼠，采用细胞融合技术并经严格筛选制得杂交瘤细胞株14H4A1和14F8B1，二株细胞诱生腹水，进而获得目标单抗。本发明提供的具有高滴度及高亲和力的恩诺沙星单克隆抗体，实现了恩诺沙星极微量残留的实际检测，为实现现场高效快速检测提供了技术支撑与物质基础。