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公开(公告)号:CN103981176A
公开(公告)日:2014-08-13
申请号:CN201410119268.7
申请日:2014-03-27
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了kan/neoR抗性报告基因突变体,其中,kan/neoR抗性基因起始密码子ATG后与其后第一个氨基酸密码子ATT之间插入一定长度的异源靶序列核苷酸片段;所述一定长度的异源核苷酸片段是指大于等于1bp碱基且小于100bp碱基的3整数倍或者非3整数倍的异源靶序列核苷酸片段。本方法通过对kan/neoR抗性报告基因插入突变,观察在不同抗性上的菌落的有无或细胞的生存与死亡进行核酸酶活性与脱靶效应的评估。该方法与现有检测技术相比具有快速、准确、方法简单、成本低的优点;尤为突出的是,这一新方法的敏感性远远高于现有技术。