公开(公告)号：CN102168063A

公开(公告)日：2011-08-31

申请号：CN201010620104.4

申请日：2010-12-31

Applicant: 苏州大学

Inventor： 叶元土 ,  蔡春芳 ,  张宝彤 ,  周志刚 ,  姚仕彬 ,  秦杰

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于动物肠道粘膜细胞分离和培养领域，具体涉及一种鱼类肠道粘膜细胞分离和原代培养方法，包括取材和培养两个步骤：按照常规方法取出鱼的肠道，清除肠道外脂肪，然后采用下述两种方法中的任一种消化分离鱼类肠道粘膜细胞，得到含有游离粘膜细胞、细胞团的消化液：将所得含有游离粘膜细胞、细胞团的消化液，离心得到粘膜细胞和细胞团的混合物，作为原代培养的接种材料细胞；所述培养步骤中，以鱼皮胶原蛋白作为培养支持载体，以改良的DMEM液作为培养基，以改良的D-Hanks液作为平衡盐溶液，在培养温度26～28℃下，pH7.2-7.4条件下进行原代培养24小时以上即可贴壁生长。采用本发明所得鱼类肠道粘膜细胞生长良好，结构和功能性标志性指标体系完善。

公开(公告)号：CN102168063B

公开(公告)日：2013-03-06

申请号：CN201010620104.4

申请日：2010-12-31

Applicant: 苏州大学

Inventor： 叶元土 ,  蔡春芳 ,  张宝彤 ,  周志刚 ,  姚仕彬 ,  秦杰

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于动物肠道粘膜细胞分离和培养领域，具体涉及一种鱼类肠道粘膜细胞分离和原代培养方法，包括取材和培养两个步骤：按照常规方法取出鱼的肠道，清除肠道外脂肪，然后采用下述两种方法中的任一种消化分离鱼类肠道粘膜细胞，得到含有游离粘膜细胞、细胞团的消化液：将所得含有游离粘膜细胞、细胞团的消化液，离心得到粘膜细胞和细胞团的混合物，作为原代培养的接种材料细胞；所述培养步骤中，以鱼皮胶原蛋白作为培养支持载体，以改良的DMEM液作为培养基，以改良的D-Hanks液作为平衡盐溶液，在培养温度26～28℃下，pH7.2-7.4条件下进行原代培养24小时以上即可贴壁生长。采用本发明所得鱼类肠道粘膜细胞生长良好，结构和功能性标志性指标体系完善。