公开(公告)号：CN114410610A

公开(公告)日：2022-04-29

申请号：CN202111492517.3

申请日：2021-12-08

Applicant: 自然资源部第三海洋研究所

Inventor： 邵宗泽 ,  周梅先 ,  闫康路 ,  董彬彬

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A61K38/47 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种环麦芽糊精酶及其制备方法与应用。所述的酶序列见SEQ ID NO：2。本发明基于喜热厌氧菌基因组测序数据分析获得环麦芽糊精酶CtCD基因序列，并对CtCD基因序列进行优化，通过人工合成的方法获得优化后的环麦芽糊精酶基因序列，并添加酶切位点SacI和XhoI，将该优化后的基因克隆入pET28a‑SUMO表达载体上，在大肠杆菌E.coli Rosette中进行诱导表达，纯化得到较高纯度的重组环麦芽糊精酶蛋白。该酶对三种环糊精(α‑环糊精、β‑环糊精和γ‑环糊精)均有很强的水解作用，该酶可用于制备麦芽六糖、麦芽七糖或麦芽八糖；该酶对致病菌(金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌)的生物膜形成有明显抑制作用，在和抗生素联用治疗生物膜引起的耐药性致病菌感染方面具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN114774441A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210289514.8

申请日：2022-03-23

Applicant: 自然资源部第三海洋研究所

Inventor： 周梅先 ,  邵宗泽 ,  闫康路 ,  董彬彬

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C07K1/22 ,  C12N1/21 ,  C12P19/04 ,  C12P19/14 ,  C12P19/16 ,  C12P19/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高温普鲁兰酶及其制备方法与应用。所述的酶序列见SEQ ID NO：2。本发明基于热球菌(Thermococcus sp.MCCC 1A01790)基因组测序数据分析获得普鲁兰酶PulTE基因序列，并对PulTE基因序列进行优化，通过人工合成的方法获得优化后的普鲁兰酶基因序列，并添加酶切位点BamHI和XhoI，将该优化后的基因克隆入pET‑28a(+)表达载体上，在大肠杆菌E.coli Rosette中进行诱导表达，纯化得到较高纯度的重组普鲁兰酶蛋白。该酶最适温度为80℃，在65～80℃条件下比较稳定；该酶具有较宽的pH作用范围，最适pH为6.5；该酶可以水解α‑(1,4)和α‑(1,6)糖苷键，对普鲁兰糖和γ‑环糊精有很强的水解作用，是一种双功能酶，在淀粉资源和普鲁兰糖的加工利用以及麦芽八糖制备方面具有优势。