公开(公告)号：CN114657194A

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202210282988.X

申请日：2022-03-22

Applicant: 自然资源部第三海洋研究所

Inventor： 周梅先 ,  邵宗泽 ,  卢传琦 ,  王万鹏 ,  付晓腾

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N9/42 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种几丁质酶Chi6115及其编码基因与应用。所述的酶序列见SEQ ID NO：2。本发明基于深海热液硫化物样品宏基因组测序数据，通过人工合成的方法获得几丁质酶chi6115基因序列，并添加酶切位点BamHI和XhoI，将该基因克隆入pET‑28a(+)表达载体上，在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达，纯化得到较高纯度的重组几丁质酶Chi6115蛋白。该酶的最适温度为55℃，最适pH为6.0；在45～60℃和pH5.0～6.5范围内酶活力较高，其酶活力均保持85％以上；该酶不仅可以水解胶体几丁质，还可以水解不溶性几丁质底物，在几丁质资源开发利用和几丁寡糖制备方面具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN114657194B

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202210282988.X

申请日：2022-03-22

Applicant: 自然资源部第三海洋研究所

Inventor： 周梅先 ,  邵宗泽 ,  卢传琦 ,  王万鹏 ,  付晓腾

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N9/42 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种几丁质酶Chi6115及其编码基因与应用。所述的酶序列见SEQ ID NO：2。本发明基于深海热液硫化物样品宏基因组测序数据，通过人工合成的方法获得几丁质酶chi6115基因序列，并添加酶切位点BamHI和XhoI，将该基因克隆入pET‑28a(+)表达载体上，在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达，纯化得到较高纯度的重组几丁质酶Chi6115蛋白。该酶的最适温度为55℃，最适pH为6.0；在45～60℃和pH5.0～6.5范围内酶活力较高，其酶活力均保持85％以上；该酶不仅可以水解胶体几丁质，还可以水解不溶性几丁质底物，在几丁质资源开发利用和几丁寡糖制备方面具有重要的应用价值。