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公开(公告)号:CN110669869A
公开(公告)日:2020-01-10
申请号:CN201910965418.9
申请日:2019-09-24
Applicant: 福建省肿瘤医院(福建省肿瘤研究所、福建省癌症防治中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种磁珠法核酸提取结合荧光PCR检测血浆EB病毒DNA的方法。包括如下步骤:步骤1、核酸提取:对血浆样本利进行磁珠法病毒核酸提取,利用异硫氰酸胍盐将病毒蛋白外壳裂解,释放出病毒核酸,通过对核酸具有吸附功能的磁珠将释放出的病毒核酸及血浆中游离状态的病毒核酸吸附到磁珠表面,通过清洗液洗去未吸附上的杂质进行核酸的纯化,最后用洗脱液将病毒核酸从磁珠上洗脱下来,作为后续PCR模板;步骤2、核酸扩增:利用商业化的病毒核酸定量检测试剂盒,在样本核酸提取纯化后通过PCR体外扩增对病毒DNA进行快速定量检测。本发明通过核酸提取的优化建立起一套具有较高分析灵敏度、可定量溯源,室间可比的血浆样本病毒DNA检测方法。