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公开(公告)号:CN118581126A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410788422.3
申请日:2024-06-18
IPC: C12N15/75 , C12N15/113 , C12N15/55
Abstract: 本发明公开一种基于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中建立的CRISPR/Cas9组件的高表达系统。本发明借助核糖体RNA(rRNA)启动子高表达的特性,构建含有rRNA启动子(P1启动子)、sgRNA片段、Cas9片段的整合质粒。将整合质粒通过整合载体pDGIEF转化至枯草芽孢杆菌SCK6中,利用枯草芽孢杆菌表达系统的优点和rRNA启动子高表达的特性,提高了CRISPR/Cas9系统在枯草芽孢杆菌中的表达效率,并通过无抗筛选避免了在实际生产应用过程中可能产生的抗性基因污染的问题。