公开(公告)号：CN110343717B

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN201910632331.X

申请日：2019-07-13

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 顾连峰 ,  魏文桃 ,  胡凯强 ,  陈凯 ,  高鹏飞 ,  丁家治 ,  王慧慧 ,  刘旭庆 ,  张千悦

IPC: C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种杉木外源基因高效瞬时转化体系的建立方法，属于植物细胞学技术领域。本发明的方法为杉木茎段通过酶解法消化酶解释放原生质体、原生质体经纯化、以PEG介导外源基因质粒DNA转化进原生质体中，实现外源基因在裸子植物杉木中的高效瞬时转化，大幅度提高杉木的转化效率。为杉木主要候选基因的分子生物学研究及遗传转化提供的技术支持。

公开(公告)号：CN109402166B

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN201811459796.1

申请日：2018-11-30

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 顾连峰 ,  马祥庆 ,  高鹏飞 ,  席飞虎 ,  魏文桃 ,  陈凯 ,  胡凯强 ,  刘博 ,  张航晓 ,  赵良真

IPC: C12N15/82 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6895 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明提供了杉木病毒诱导基因沉默系统及其构建方法，属于林木基因工程领域。包括如下步骤：杉木植株材料的培养；目的基因片段的克隆；重组病毒质粒载体的构建；农杆菌介导沉默载体侵染杉木植株；沉默效果结果验证。使用本发明可以根据植株表型的变化来探究目标基因的功能机制，该VIGS体系的建立对林木裸子植物功能基因的研究具有开创性的意义。

公开(公告)号：CN113025688A

公开(公告)日：2021-06-25

申请号：CN202110347673.4

申请日：2021-03-31

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 席飞虎 ,  胡凯强 ,  陈凯 ,  高鹏飞 ,  周裕涵 ,  顾连峰

IPC: C12Q1/6806 ,  C12N15/10 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明名公开了一种基于Oxford Nanopore Technologies的序列特异性直接RNA测序文库构建方法及应用，属于三代高通量测序技术领域。其构建方法为：总RNA的提取和质量控制；从总RNA中去除rRNA和质量控制；设计序列特异性逆转录接头的设计、构建和质量控制；基于Oxford Nanopore Technologies的直接RNA测序文库构建；序列特异性RNA的检测。本方法重新设计ssRTA并将其应用于基于Oxford Nanopore Technologies的直接RNA测序文库，主要应用于测定不带ploy(A)尾的线性转录本，这是以往任何流程无法做到的。

公开(公告)号：CN110343717A

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201910632331.X

申请日：2019-07-13

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 顾连峰 ,  魏文桃 ,  胡凯强 ,  陈凯 ,  高鹏飞 ,  丁家治 ,  王慧慧 ,  刘旭庆 ,  张千悦

IPC: C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种杉木外源基因高效瞬时转化体系的建立方法，属于植物细胞学技术领域。本发明的方法为杉木茎段通过酶解法消化酶解释放原生质体、原生质体经纯化、以PEG介导外源基因质粒DNA转化进原生质体中，实现外源基因在裸子植物杉木中的高效瞬时转化，大幅度提高杉木的转化效率。为杉木主要候选基因的分子生物学研究及遗传转化提供的技术支持。

公开(公告)号：CN109402166A

公开(公告)日：2019-03-01

申请号：CN201811459796.1

申请日：2018-11-30

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 顾连峰 ,  马祥庆 ,  高鹏飞 ,  席飞虎 ,  魏文桃 ,  陈凯 ,  胡凯强 ,  刘博 ,  张航晓 ,  赵良真

IPC: C12N15/82 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6895 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明提供了杉木病毒诱导基因沉默系统及其构建方法，属于林木基因工程领域。包括如下步骤：杉木植株材料的培养；目的基因片段的克隆；重组病毒质粒载体的构建；农杆菌介导沉默载体侵染杉木植株；沉默效果结果验证。使用本发明可以根据植株表型的变化来探究目标基因的功能机制，该VIGS体系的建立对林木裸子植物功能基因的研究具有开创性的意义。