公开(公告)号：CN104109704B

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201410324737.9

申请日：2014-07-09

Applicant: 福州大学 ,  福州大北农生物技术有限公司

Inventor： 吕暾 ,  王立波 ,  乔春晓 ,  王伟东 ,  庄星来 ,  洪晶 ,  林拱阳 ,  陈晟生

IPC: C12P21/02 ,  C07K14/01 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种重组猪圆环病毒衣壳蛋白包涵体的分离纯化方法。本发明在诱导产生包涵体后，通过优化的裂解方法破碎菌体，初步去除了一部分杂质，接着通过对包涵体进行一系列处理，使得包涵体形成可溶性目标蛋白，避免了使用尿素、盐酸胍等变性剂对包涵体的变性溶解和复性。而镍柱亲和层析使得可以纯化获得的蛋白量比较大，具有纯度高，操作简单等优点。本发明从不溶性包涵体中分离纯化出来可溶性的目的蛋白，避免了反复变性复性的繁琐步骤以及复性过程中的蛋白沉淀的危险，并且所获得的蛋白纯度可以达到电泳纯。

公开(公告)号：CN104109704A

公开(公告)日：2014-10-22

申请号：CN201410324737.9

申请日：2014-07-09

Applicant: 福州大学 ,  福州大北农生物技术有限公司

Inventor： 吕暾 ,  王立波 ,  乔春晓 ,  王伟东 ,  庄星来 ,  洪晶 ,  林拱阳 ,  陈晟生

IPC: C12P21/02 ,  C07K14/01 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种重组猪圆环病毒衣壳蛋白包涵体的分离纯化方法。本发明在诱导产生包涵体后，通过优化的裂解方法破碎菌体，初步去除了一部分杂质，接着通过对包涵体进行一系列处理，使得包涵体形成可溶性目标蛋白，避免了使用尿素、盐酸胍等变性剂对包涵体的变性溶解和复性。而镍柱亲和层析使得可以纯化获得的蛋白量比较大，具有纯度高，操作简单等优点。本发明从不溶性包涵体中分离纯化出来可溶性的目的蛋白，避免了反复变性复性的繁琐步骤以及复性过程中的蛋白沉淀的危险，并且所获得的蛋白纯度可以达到电泳纯。