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公开(公告)号:CN103667219A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201310664188.5
申请日:2013-12-11
Applicant: 福州大学
IPC: C12N9/42
CPC classification number: C12N9/2445 , C12Y302/01021
Abstract: 本发明提供一种能够获得高酶活回收率的β-葡萄糖苷酶交联聚集体的制备方法,包括以下步骤:(1)将沉降剂加入β-葡萄糖苷酶溶液中,振荡;(2)加入戊二醛;(3)向混合液中加入还原剂,振荡后,离心,收集沉淀;整个反应过程的反应温度控制在4~6℃,pH值为5.0~5.5;其中,步骤(1)的沉降剂为1,4-二氧六环,1,4-二氧六环与β-葡萄糖苷酶液的体积比为2~3:1;步骤(2)中戊二醛的浓度为38~43mM,交联时间为8~12min;还原剂为硼氢化钠(NaBH4),NaBH4的浓度为20~25mM。
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公开(公告)号:CN103642880B
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201310664233.7
申请日:2013-12-11
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供一种β-葡萄糖苷酶交联聚集体(简称:β-葡萄糖苷酶CLEAs)催化合成红景天苷的工艺,其中,在红景天苷合成阶段中:反应体系为1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐/仿水溶剂/1,4-二氧六环/缓冲溶液,仿水溶剂为乙酸乙酯,β-葡萄糖苷酶CLEAs的单位酶活为1.3~1.6U/ml,1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐与乙酸乙酯的体积和与1,4-二氧六环体积比为2:3~3:2,缓冲溶液的体积分数为12~18%;反应温度为48~52℃,反应5~9d。本发明能够大幅提高产物红景天苷的浓度,且可保持较高的β-葡萄糖苷酶CLEAs残余相对酶活。
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公开(公告)号:CN103642880A
公开(公告)日:2014-03-19
申请号:CN201310664233.7
申请日:2013-12-11
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供一种β-葡萄糖苷酶交联聚集体(简称:β-葡萄糖苷酶CLEAs)催化合成红景天苷的工艺,其中,在红景天苷合成阶段中:反应体系为1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐/仿水溶剂/1,4-二氧六环/缓冲溶液,仿水溶剂为乙酸乙酯,β-葡萄糖苷酶CLEAs的单位酶活为1.3~1.6U/ml,1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐与乙酸乙酯的体积和与1,4-二氧六环体积比为2:3~3:2,缓冲溶液的体积分数为12~18%;反应温度为48~52℃,反应5~9d。本发明能够大幅提高产物红景天苷的浓度,且可保持较高的β-葡萄糖苷酶CLEAs残余相对酶活。
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公开(公告)号:CN103710412B
公开(公告)日:2016-02-24
申请号:CN201310664189.X
申请日:2013-12-11
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供β-葡萄糖苷酶交联聚集体催化合成红景天苷的工艺,其中,红景天苷合成阶段的反应条件为:反应体系为1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐(C4MIm·PF6)/1,4-二氧六环/缓冲溶液,β-葡萄糖苷酶交联聚集体的单位酶活为1.3~1.6U/ml,C4MIm·PF6与1,4-二氧六环的体积比为2:3~3:2,缓冲溶液的体积分数为12~18%;反应温度为48~52℃,转速为245~255rpm,反应5~9d。本发明能够大幅提高产物红景天苷的浓度,且可保持较高的β-葡萄糖苷酶交联聚集体残余相对酶活。
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公开(公告)号:CN103710412A
公开(公告)日:2014-04-09
申请号:CN201310664189.X
申请日:2013-12-11
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供β-葡萄糖苷酶交联聚集体催化合成红景天苷的工艺,其中,红景天苷合成阶段的反应条件为:反应体系为1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐(C4MIm·PF6)/1,4-二氧六环/缓冲溶液,β-葡萄糖苷酶交联聚集体的单位酶活为1.3~1.6U/ml,C4MIm·PF6与1,4-二氧六环的体积比为2:3~3:2,缓冲溶液的体积分数为12~18%;反应温度为48~52℃,转速为245~255rpm,反应5~9d。本发明能够大幅提高产物红景天苷的浓度,且可保持较高的β-葡萄糖苷酶交联聚集体残余相对酶活。
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