提高低温冻存烟草花粉生活力的方法

    公开(公告)号:CN107771785A

    公开(公告)日:2018-03-09

    申请号:CN201711190844.7

    申请日:2017-11-24

    CPC classification number: A01N3/00 C12N5/04

    Abstract: 提高低温冻存烟草花粉生活力的方法,包括采集花粉;液体培养法测定花粉活力;在花粉中添加低温保护剂可溶性淀粉和纳米微粒;花粉冻存:液氮速冻后分别保存在-20℃、-80℃和-196℃;花粉复融:冻存花粉取出后立即用流水冲5min。同时使用纳米微粒和可溶性淀粉作为低温冷冻保护剂,可以有效提高烟草花粉的低温冻存花粉活力。可溶性淀粉在低温冻存花粉时能保持花粉的干燥状态。羟基磷灰石纳米微粒对生物细胞膜就有较好的生物相容性,在增加冷却速率、提高细胞黏附程度和保护细胞遗传物质方面有重要的作用。在花粉复融时采用流水冲的方式,避免了在化冻过程中产生花粉细胞内的次生结冰对细胞膜体系的破坏,提高了花粉在低温长期冻存后的活力。

    烟草花粉管的半离体培养方法

    公开(公告)号:CN107723270A

    公开(公告)日:2018-02-23

    申请号:CN201711193369.9

    申请日:2017-11-24

    CPC classification number: C12N5/04 C12N5/0025

    Abstract: 烟草花粉管的半离体培养方法,具体步骤为:取烟草始开期雌蕊,授粉后置于28 ℃恒温箱中预培养;用剃须刀片切割预培养的花柱二分之一或四分之三部位,切割完毕后置于含培养基的载玻片上,在保湿盒中28 ℃继续培养24 h;培养结束后,花粉管从花柱切割部位成束长出;用眼科镊在显微镜下切取花粉管,悬浮于含培养基的离心管中,5000 rpm离心10 min即可获得半离体培养的烟草花粉管。本发明中的培养基组分简单有效,可重复性高,针对花柱不同切割部位设置不同的培养时间和培养基,易于操作,为高效收集烟草半离体培养花粉管提供了有效途径。该方式适用于自交授粉和没有花柱不亲和阻碍的杂交授粉组合,为研究烟草花粉管和雌蕊互作调控机制提供了稳定体系。

    一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN111217914B

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202010102860.1

    申请日:2020-02-19

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用,所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.1所示的CDR1的氨基酸序列GYTFTDYY,SEQ ID NO.2所示的CDR2的氨基酸序列INPYNGDT和SEQ ID NO.3所示的CDR3的氨基酸序列AREDYSGSSYVANFDY;所述的单克隆抗体的轻链可变区序列包含SEQ ID NO.4所示的CDR1的氨基酸序列KSLLHSNGITY,SEQ ID NO.5所示的CDR2的氨基酸序列QMS和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列AQNLELWT。本发明提供一种用于检测烟草多酚氧化酶的单克隆抗体及其应用,以通过提供一个靶向蛋白研究的工具,使得对烟草和其它植物不同组织,不同生理条件下PPO蛋白表达变化及蛋白网络图谱的更深层次研究得以实现。

    一种万寿菊叶片原生质体的制备方法

    公开(公告)号:CN118813517A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202410906980.5

    申请日:2024-07-08

    Abstract: 本发明涉及植物原生质体制备领域,特别是涉及一种万寿菊叶片原生质体的制备方法。包括:将万寿菊幼嫩叶片进行黑暗处理,得到处理叶片;将处理叶片与原生质体酶解液混合、酶解,得到酶解物;将得到的酶解物过滤、离心、洗涤和纯化,得到万寿菊叶片原生质体。本发明通过对万寿菊叶片进行低温、黑暗预处理,利用原生质体酶解液、洗涤液和纯化液建立了高效的万寿菊叶片的原生质体制备体系,可在短期内获得大量完整的原生质体,为后续万寿菊原生质体培养、瞬时转化建立了坚实的基础。

    一种铜离子应答蛋白脱水蛋白NtDHN17及其应用

    公开(公告)号:CN113943358B

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202111289231.5

    申请日:2021-11-02

    Applicant: 云南大学

    Abstract: 本发明提供了一种铜离子应答蛋白脱水蛋白NtDHN17及其应用,属于植物基因工程技术领域。一种铜离子应答蛋白脱水蛋白NtDHN17,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过构建NtDhn17基因的过表达和沉默表达株系,证实NtDhn17基因功能缺失造成植物对铜离子不耐受,光合效率下降,生长迟缓和植株整体生长受限,而过表达植株不影响植物的正常生长发育,而且提高了植株铜离子耐受性。脱水蛋白NtDHN17的K片段在植物中具有较高的保守性。同时异源表达NtDhn17的大肠杆菌提高了对环境中铜离子的耐受性,预见其蛋白在其他陆生植物尤其是农作物中具有相同或相近的功能。

    促植物生长的青霉菌发酵物有机提取物的制备及其应用

    公开(公告)号:CN115812741A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211055504.4

    申请日:2022-08-29

    Applicant: 云南大学

    Abstract: 本发明公开了促植物生长的青霉菌发酵物有机提取物的制备及其应用,涉及生物技术领域,针对现有的无法将青霉菌发酵物中促进植物生长的有效成份分离出来。现提出如下方案,其包括青霉菌发酵物有机提取物,将青霉菌发酵物经过100℃高温烘干,加入甲醇萃取后,再用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯提取物再经硅胶柱分离,便可以得到青霉菌发酵物的有机提取物。本发明提供的一种促植物生长的青霉菌发酵物有机提取物及其制备的方法和应用,该方法操作简单、成本低,将青霉菌发酵物变废为宝,实现了有机废弃物的资源化。

    一种复合花粉介质、万寿菊复合介质花粉及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115191452B

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202210863357.7

    申请日:2022-07-20

    Applicant: 云南大学

    Abstract: 本发明属于植物花粉制备技术领域,具体涉及一种复合花粉介质、万寿菊复合介质花粉及其制备方法和应用。本发明所述复合花粉介质以假酸浆种子为固体分散剂,且由于其富含氨基酸、脂类和小分子等天然花粉促萌发生长因子,具备等同于促花粉萌发生长因子的作用,可显著提高花粉的萌发率和花粉使用效率;同时在复合花粉介质中外源添加惰性分子多糖和促花粉萌发因子,与假酸浆种子复配得到复合花粉介质可促进万寿菊花粉萌发、提高万寿菊授粉使用效率和万寿菊种子产量。

    一种青霉菌发酵物多糖的制备及其应用

    公开(公告)号:CN115260332A

    公开(公告)日:2022-11-01

    申请号:CN202211042404.8

    申请日:2022-08-29

    Applicant: 云南大学

    Abstract: 本发明公开了一种青霉菌发酵物多糖的制备及其应用,涉及一种微生物有效组分提取技术领域。现提出如下方案,制备方法包括:青霉菌发酵物经95%乙醇浸泡、热水浸提、乙醇沉淀、脱蛋白、脱盐等步骤;应用包括:青霉菌发酵物多糖在防治心叶烟TMV中的应用、青霉菌发酵物多糖在钝化烟草花叶病毒中的应用;本发明的有益效果为:多糖提取效率高、操作简便、成本低廉,用于防治烟草病毒病效果佳,为烟草病害的防治提供了具有开发前景的活性成分。

    一种复合花粉介质、万寿菊复合介质花粉及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115191452A

    公开(公告)日:2022-10-18

    申请号:CN202210863357.7

    申请日:2022-07-20

    Applicant: 云南大学

    Abstract: 本发明属于植物花粉制备技术领域,具体涉及一种复合花粉介质、万寿菊复合介质花粉及其制备方法和应用。本发明所述复合花粉介质以假酸浆种子为固体分散剂,且由于其富含氨基酸、脂类和小分子等天然花粉促萌发生长因子,具备等同于促花粉萌发生长因子的作用,可显著提高花粉的萌发率和花粉使用效率;同时在复合花粉介质中外源添加惰性分子多糖和促花粉萌发因子,与假酸浆种子复配得到复合花粉介质可促进万寿菊花粉萌发、提高万寿菊授粉使用效率和万寿菊种子产量。

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