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公开(公告)号：CN117025726A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311115912.9
申请日：2023-08-31
Applicant: 湖南大学
IPC: C12Q1/6816
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPR‑DNA识别器件的细胞成像的试剂及其应用。以细胞膜表面两种特异性蛋白为靶点，利用两条多功能适体序列实现细胞膜表面蛋白的逻辑识别，从而将调控CRISPR‑Cas12a核酸酶活性的触发链绑定在靶细胞膜表面，Cas12a/crRNA二元复合物通过与触发链的识别和结合使Cas12a在细胞膜表面被原位激活。被激活的Cas12a在活细胞膜表面在一定空间内裂解周围的胆固醇DNA四面体底物探针，使BHQ2基团远离细胞膜，TAMRA荧光快速恢复。本发明不仅能够在20min内实现靶细胞精准成像，而且在含有0.1％靶细胞的血液样本中实现了灵敏的识别。
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