可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN102229933A

    公开(公告)日:2011-11-02

    申请号:CN201110148603.2

    申请日:2011-06-03

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV NS5A蛋白的核酸适体,其为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5中任一序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒NS5A蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒NS5A蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒在肝细胞内复制的试剂。

    一种可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN102864150B

    公开(公告)日:2013-08-21

    申请号:CN201210377235.3

    申请日:2011-06-03

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体,其为SEQIDNO:5序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒NS5A蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒NS5A蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒在肝细胞内复制的试剂。

    一种可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN102864150A

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN201210377235.3

    申请日:2011-06-03

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV NS5A蛋白的核酸适体,其为SEQIDNO:5序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒NS5A蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒NS5A蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒在肝细胞内复制的试剂。

    一种微量样品中HBV pgRNA的高区分度检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN113755642A

    公开(公告)日:2021-12-07

    申请号:CN202111060217.8

    申请日:2021-09-10

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明涉及一种微量样品中HBV pgRNA的高区分度检测试剂盒及检测方法,检测方法以下步骤:(1)使用一步法逆转录及PCR扩增直接对待测样品进行逆转录及PCR扩增,所用引物为一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F1的核苷酸序列如SEQ NO:1所示,反向引物P‑R1的核苷酸序列如SEQ NO:2所示;(2)将一步法逆转录及PCR扩增所得到的产物作为模板,进行荧光定量PCR反应检测HBV pgRNA的含量,所用引物为另一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F2的核苷酸序列如SEQ NO:3所示,反向引物P‑R2的核苷酸序列如SEQ NO:4所示。

    可识别HCVE1E2蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN102229932A

    公开(公告)日:2011-11-02

    申请号:CN201110148431.9

    申请日:2011-06-03

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV E1E2蛋白的核酸适体,其为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5中任一序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒E1E2蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒E1E2蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒感染肝细胞的试剂。

    可识别HCVE1E2蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN102229932B

    公开(公告)日:2013-02-27

    申请号:CN201110148431.9

    申请日:2011-06-03

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV E1E2蛋白的核酸适体,其为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5中任一序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒E1E2蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒E1E2蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒感染肝细胞的试剂。

    一种微量样品中HBV pgRNA的高区分度检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN113755642B

    公开(公告)日:2024-03-29

    申请号:CN202111060217.8

    申请日:2021-09-10

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明涉及一种微量样品中HBV pgRNA的高区分度检测试剂盒及检测方法,检测方法以下步骤:(1)使用一步法逆转录及PCR扩增直接对待测样品进行逆转录及PCR扩增,所用引物为一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F1的核苷酸序列如SEQ NO:1所示,反向引物P‑R1的核苷酸序列如SEQ NO:2所示;(2)将一步法逆转录及PCR扩增所得到的产物作为模板,进行荧光定量PCR反应检测HBV pgRNA的含量,所用引物为另一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F2的核苷酸序列如SEQ NO:3所示,反向引物P‑R2的核苷酸序列如SEQ NO:4所示。

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