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公开(公告)号:CN102229933A
公开(公告)日:2011-11-02
申请号:CN201110148603.2
申请日:2011-06-03
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV NS5A蛋白的核酸适体,其为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5中任一序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒NS5A蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒NS5A蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒在肝细胞内复制的试剂。
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公开(公告)号:CN102864150B
公开(公告)日:2013-08-21
申请号:CN201210377235.3
申请日:2011-06-03
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体,其为SEQIDNO:5序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒NS5A蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒NS5A蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒在肝细胞内复制的试剂。
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公开(公告)号:CN102864150A
公开(公告)日:2013-01-09
申请号:CN201210377235.3
申请日:2011-06-03
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV NS5A蛋白的核酸适体,其为SEQIDNO:5序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒NS5A蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒NS5A蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒在肝细胞内复制的试剂。
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公开(公告)号:CN113755642A
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN202111060217.8
申请日:2021-09-10
Applicant: 湖南大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种微量样品中HBV pgRNA的高区分度检测试剂盒及检测方法,检测方法以下步骤:(1)使用一步法逆转录及PCR扩增直接对待测样品进行逆转录及PCR扩增,所用引物为一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F1的核苷酸序列如SEQ NO:1所示,反向引物P‑R1的核苷酸序列如SEQ NO:2所示;(2)将一步法逆转录及PCR扩增所得到的产物作为模板,进行荧光定量PCR反应检测HBV pgRNA的含量,所用引物为另一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F2的核苷酸序列如SEQ NO:3所示,反向引物P‑R2的核苷酸序列如SEQ NO:4所示。
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公开(公告)号:CN102229932A
公开(公告)日:2011-11-02
申请号:CN201110148431.9
申请日:2011-06-03
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV E1E2蛋白的核酸适体,其为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5中任一序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒E1E2蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒E1E2蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒感染肝细胞的试剂。
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公开(公告)号:CN103305467B
公开(公告)日:2016-06-15
申请号:CN201310214644.6
申请日:2013-05-31
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N5/09 , C12Q1/02 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种人肝癌细胞系HLCZ02,该人肝癌细胞系HLCZ02为保藏于中国典型培养物保藏中心、且保藏号为CCTCC NO:C201310的人肝癌细胞系。本发明的人肝癌细胞系HLCZ02可作为细胞模型或动物模型进行应用,还可用于制备、筛选或评价抗肝炎病毒药物、抗肿瘤药物,还可用于制备人造肝。
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公开(公告)号:CN102229932B
公开(公告)日:2013-02-27
申请号:CN201110148431.9
申请日:2011-06-03
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种可识别HCV E1E2蛋白的核酸适体,其为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5中任一序列所示的DNA片段,其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括:先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒E1E2蛋白,再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白;然后对蛋白进行固定,并设计随机核酸文库;最后进行核酸适体的筛选,筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤,最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒E1E2蛋白的检测试剂盒或诊断试剂,还可用于制备抑制丙型肝炎病毒感染肝细胞的试剂。
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公开(公告)号:CN113755642B
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202111060217.8
申请日:2021-09-10
Applicant: 湖南大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种微量样品中HBV pgRNA的高区分度检测试剂盒及检测方法,检测方法以下步骤:(1)使用一步法逆转录及PCR扩增直接对待测样品进行逆转录及PCR扩增,所用引物为一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F1的核苷酸序列如SEQ NO:1所示,反向引物P‑R1的核苷酸序列如SEQ NO:2所示;(2)将一步法逆转录及PCR扩增所得到的产物作为模板,进行荧光定量PCR反应检测HBV pgRNA的含量,所用引物为另一对巢式PCR引物,其正向引物P‑F2的核苷酸序列如SEQ NO:3所示,反向引物P‑R2的核苷酸序列如SEQ NO:4所示。
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公开(公告)号:CN110859840A
公开(公告)日:2020-03-06
申请号:CN201911205290.2
申请日:2019-11-29
IPC: A61K31/455 , A61P1/16 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及一种烟酸在制备慢性乙型肝炎治疗和\或辅助治疗药物中的应用。本发明能够显著降低HBV的S抗原、Core蛋白的表达水平,阻止HBV成熟病毒颗粒释放至细胞外,从而使得细胞内HBV的cccDNA、Total DNA和pgRNA等病毒源性的核酸物质发生积累,并促进MAPK信号通路发生活化,增强抗病毒的炎症细胞因子TNF-α产生,最终导致细胞内HBV的S抗原、Core蛋白以及HBV的遗传物质cccDNA发生显著较低,从而达到明显的抗病毒长期慢性感染的作用。
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公开(公告)号:CN103305467A
公开(公告)日:2013-09-18
申请号:CN201310214644.6
申请日:2013-05-31
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N5/09 , C12Q1/02 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种人肝癌细胞系HLCZ02,该人肝癌细胞系HLCZ02为保藏于中国典型培养物保藏中心、且保藏号为CCTCC NO:C201310的人肝癌细胞系。本发明的人肝癌细胞系HLCZ02可作为细胞模型或动物模型进行应用,还可用于制备、筛选或评价抗肝炎病毒药物、抗肿瘤药物,还可用于制备人造肝。
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