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公开(公告)号:CN119877112A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510016235.8
申请日:2025-01-06
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 广东中芯种业科技有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
Abstract: 本发明公开了一种猪全精子膜蛋白抗原特异性纳米抗体文库构建方法,包括:S1:将猪全精子免疫羊驼,免疫后分离外周血细胞;S2:提取外周血细胞中的RNA,反转录得到cDNA,并扩增抗体的VHH编码序列;S3:将扩增的VHH编码序列克隆到噬菌体质粒载体上制备重组噬菌体载体;S4:将重组噬菌体载体转化大肠杆菌并扩大培养,获得噬菌体展示文库;S5:利用猪X/Y精子对噬菌体展示文库进行若干次淘选,构建猪单个性别精子特异性纳米抗体文库。该方法首次采用猪全精子作为免疫原来免疫羊驼,其构建的抗体文库库容量达到3.4×108pfu,抗体库丰度更高,对全精子抗原覆盖度更高、种类更齐全,从而提高猪性控特异性抗体的捕获成功率,为猪精子特异性抗体的产业化应用奠定基础。
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公开(公告)号:CN119751670A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202510016199.5
申请日:2025-01-06
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 广东中芯种业科技有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
IPC: C07K16/18 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N15/10 , C07K16/00 , C40B50/06 , G01N33/543 , G01N33/532 , G01N33/569 , C12N5/076 , C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种猪精子特异性抗体,该抗体的编码序列如SEQ IDNo:1‑3中任一项所示。本发明通过猪全精子免疫羊驼制备纳米抗体文库,然后可以通过文库筛选出可与X或Y精子特异性结合的抗体,来实现X、Y精子的分选。而且筛选的抗体为纳米抗体,大小仅为传统抗体的10%,结构更加简单,具有稳定性高、特异性强、免疫原性低的优点,可实现抗体规模化表达,极大降低抗体生产成本,便于产业化应用。
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