公开(公告)号：CN109609450A

公开(公告)日：2019-04-12

申请号：CN201910032678.0

申请日：2019-01-14

Applicant: 温州医科大学附属第一医院

Inventor： 陈必成 ,  李杰

IPC: C12N5/0783

Abstract: 本发明公开了一种用于减少调节性T细胞(Treg)比例的培养基及其培养方法，本发明使用IL-7及IL-15细胞因子替代传统培养基中的IL-2，所述培养基包含150ng/ml IL-7、250ng/ml IL-15、0.05mM硫代甘油、0.1mM N-乙酰-L-半胱氨酸。所述培养方法包括如下步骤：分离外周血单个核细胞；Anti-CD3与anti-CD28抗体包被细胞培养瓶；使用所述培养基对T细胞进行体外扩增；离心收集T细胞。经14天的T细胞体外扩增培养，得到与传统IL-2细胞因子培养方法相当的T细胞总数，其中调节性T细胞的比例可控制在1％以下。本发明可在保证T细胞杀伤肿瘤靶细胞功能的前提下，有效减少调节性T细胞在体外扩增T细胞中的产生，大幅降低肿瘤的治疗中免疫抑制的不良影响。

公开(公告)号：CN109652371A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201910033351.5

申请日：2019-01-14

Applicant: 温州医科大学附属第一医院

Inventor： 孙洪伟 ,  陈必成 ,  李杰

IPC: C12N5/0783

Abstract: 本发明公开了一种用于获取记忆性T淋巴细胞亚群培养基的配置方法。本发明中的无血清培养基是在RPMI 1640基础培养基中添加40μg/ml胰岛素、10μg/ml转铁蛋白、101μg/ml乙醇胺、2mg/ml过氧化氢酶等细胞因子，并配合使用Trace element A、Trace element B微量元素。该无血清培养基可提高T细胞的扩增倍数，并显著提高记忆性T细胞占总T细胞的比例，适用于体外的记忆性T淋巴细胞亚群细胞的生产，有利于提高CAR-T细胞清除患者体内肿瘤的效率，对CAR-T细胞免疫治疗具有积极意义。