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公开(公告)号：CN108977506B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201810897846.8
申请日：2018-08-08
Applicant: 浙江海洋大学
IPC: C12Q1/6841 , C12Q1/6834 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及海洋生物技术领域，尤其涉及一种快速筛选产生膝沟藻毒素微生物菌株的方法及其所用的地高辛标记DNA探针，该方法使用的探针是与待测DNA碱基互补的248个碱基长度的单链DNA，探针3′端被地高辛标记。通过菌落原位斑点分子杂交，该探针可特异性检测待测菌株DNA样品中有否有膝沟藻毒素合成(sxtS)基因核酸的存在，筛选出产毒阳性菌株。本发明涉及的方法利用菌株DNA原位提取物进行菌落斑点杂交，可在8‑10小时内完成96个样品筛选。本发明的方法快速，特异性强且准确性高。
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公开(公告)号：CN108977477B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201810867028.3
申请日：2018-08-01
Applicant: 浙江海洋大学
Abstract: 本发明涉及海洋微生物发酵技术领域，尤其涉及一种利用海洋产毒甲藻共栖细菌发酵制备西加毒素的方法，包括以下步骤：(1)摇瓶种子液；(2)种子液的准备；(3)发酵培养；(4)发酵液的萃取提纯；(5)粗提物的纯化：经制备液相色谱洗脱，收集，旋转蒸发，获得白色粉末，即得西加毒素。本发明使用海洋甲藻共栖细菌株Haliea sp.LZ16‑2为生产菌种，该菌种发酵西加毒素产率较高，可达21.1～25.3μg/L，其发酵时间为60～64小时，节省能耗；方法步骤简单、工作量小，周期较短，所用试剂与材料均为微生物发酵试验常用试剂，对人体无害，对环境友好，成本低，具有较高的市场前景与经济价值。
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公开(公告)号：CN108949867B
公开(公告)日：2021-06-18
申请号：CN201810866035.1
申请日：2018-08-01
Applicant: 浙江海洋大学
Abstract: 本发明涉及海洋微生物发酵技术领域，尤其涉及一种利用海洋细菌发酵制备海葵毒素的方法，包括以下步骤：(1)摇瓶种子液；(2)种子液的准备；(3)发酵培养；(4)发酵液的萃取提纯；(5)粗提物的纯化：经制备液相色谱洗脱，收集，旋转蒸发，获得白色粉末，即得海葵毒素。本发明采用海洋细菌菌株Nioella sp.LZ7‑4发酵产生海葵毒素发酵周期短，仅为36～40小时，可有效节省能耗；产率较高，可达到38μg/L以上；方法步骤简单、工作量小，周期较短，所用试剂与材料均为微生物发酵试验常用试剂，对人体无害，对环境友好，成本低，具有较高的市场前景与经济价值。
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公开(公告)号：CN108977505A
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201810896896.4
申请日：2018-08-08
Applicant: 浙江海洋大学
IPC: C12Q1/6841 , C12Q1/6834 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及海洋生物技术领域，尤其涉及一种快速筛选产生河豚毒素微生物菌株的方法及其所用的地高辛标记DNA探针，该方法使用的探针是与待测DNA碱基互补的254个碱基长度的单链DNA，探针3′端被地高辛标记。通过菌落原位斑点分子杂交，该探针可特异性检测待测菌株DNA样品中有否有河豚毒素合成sxt基因核酸的存在，筛选出产毒阳性菌株。本发明涉及的方法利用菌株DNA原位提取物进行菌落斑点杂交，可在8-10小时内完成96个样品筛选。本发明的方法快速，特异性强且准确性高。
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公开(公告)号：CN109251946B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN201811168447.4
申请日：2018-10-08
Applicant: 浙江海洋大学
IPC: C12P17/10 , C12N1/20 , C07D207/16 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及海洋微生物发酵技术领域，解决了通过硅藻培养提取的方法制备软骨藻酸培养周期长、成本高的问题，公开了一种利用海洋硅藻共栖细菌发酵制备遗忘性贝毒软骨藻酸的方法。该制备方法为先进行菌株活化，然后接种到种子培养液中进行培养，再接种到发酵液中进行发酵得到遗忘性贝毒软骨藻酸发酵液，最后对菌株进行浸泡提取，纯化得到遗忘性贝毒软骨藻酸。本发明通过细菌发酵的方法制备软骨藻酸具有发酵时间短，成本低，代谢调控相对简单。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108977504A
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201810884717.5
申请日：2018-08-06
Applicant: 浙江海洋大学
IPC: C12Q1/6841 , C12Q1/6834 , C12Q1/04
Abstract: 本发明涉及海洋生物技术领域，尤其涉及一种快速筛选产生鳍藻毒素微生物菌株的方法，包括以下步骤：(1)预处理：制作并固定待测菌株的DNA；(2)杂交：将待测菌株的DNA与标记单链DNA探针进行杂交作用；(3)筛选：通过特异性检测待测菌株是否产生鳍藻毒素。本发明通过菌落原位斑点分子杂交，标记单链DNA探针可特异性检测待测菌株DNA样品中是否产生鳍藻毒素；成本低、快速、准确性及灵敏度高的特性；分析成本低，周期短，所用试剂绿色环保，对人体无害，具有较高的市场前景与经济价值。
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公开(公告)号：CN108977504B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201810884717.5
申请日：2018-08-06
Applicant: 浙江海洋大学
IPC: C12Q1/6841 , C12Q1/6834 , C12Q1/04
Abstract: 本发明涉及海洋生物技术领域，尤其涉及一种快速筛选产生鳍藻毒素微生物菌株的方法，包括以下步骤：(1)预处理：制作并固定待测菌株的DNA；(2)杂交：将待测菌株的DNA与标记单链DNA探针进行杂交作用；(3)筛选：通过特异性检测待测菌株是否产生鳍藻毒素。本发明通过菌落原位斑点分子杂交，标记单链DNA探针可特异性检测待测菌株DNA样品中是否产生鳍藻毒素；成本低、快速、准确性及灵敏度高的特性；分析成本低，周期短，所用试剂绿色环保，对人体无害，具有较高的市场前景与经济价值。
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公开(公告)号：CN108949867A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810866035.1
申请日：2018-08-01
Applicant: 浙江海洋大学
Abstract: 本发明涉及海洋微生物发酵技术领域，尤其涉及一种利用海洋细菌发酵制备海葵毒素的方法，包括以下步骤：(1)摇瓶种子液；(2)种子液的准备；(3)发酵培养；(4)发酵液的萃取提纯；(5)粗提物的纯化：经制备液相色谱洗脱，收集，旋转蒸发，获得白色粉末，即得海葵毒素。本发明采用海洋细菌菌株Nioella sp.LZ7‑4发酵产生海葵毒素发酵周期短，仅为36～40小时，可有效节省能耗；产率较高，可达到38μg/L以上；方法步骤简单、工作量小，周期较短，所用试剂与材料均为微生物发酵试验常用试剂，对人体无害，对环境友好，成本低，具有较高的市场前景与经济价值。
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公开(公告)号：CN108949848B
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN201810898503.3
申请日：2018-08-08
Applicant: 浙江海洋大学
Abstract: 本发明涉及海洋微生物发酵领域，尤其涉及一种利用海洋细菌发酵制备腹泻性贝类毒素软海绵酸的方法。所述的方法包括以下步骤：（1）菌株活化；（2）种子液的准备；（3）发酵罐培养发酵；（4）发酵液的提取；（5）粗提物的纯化即得软海绵酸。与现有技术相比，本发明具有以下优点：（1）本发明采用海洋细菌发酵产生软海绵酸发酵周期短，仅为40~42小时，可节省能耗。（2）本发明采用海洋细菌发酵产生软海绵酸，产率较高，可达50~68μg/L。（3）本发明方法步骤简单、工作量小，周期较短，所用试剂与材料均为微生物发酵试验常用试剂，对人体无害，对环境友好，成本低，具有较高的市场前景与经济价值。
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公开(公告)号：CN109097415A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201810898501.4
申请日：2018-08-08
Applicant: 浙江海洋大学
Abstract: 本发明属于海洋微生物发酵领域，尤其是涉及一种利用产毒海洋亚硫酸杆菌发酵制备石房蛤毒素的方法。所述的方法包括以下步骤：（1）菌株活化；（2）种子液的准备；（3）发酵罐培养发酵；（4）发酵液的提取；（5）粗提物的纯化，即得石房蛤毒素。与现有技术相比，本发明具有以下优点：（1）本发明方法使用海洋微生物菌株亚硫酸杆菌Z1-D为生产菌种，该菌种发酵石房蛤毒素产率较高，可达61.5-72.8μg/L，其发酵时间为40-48小时，节省能耗；（2）本发明方法步骤简单、工作量小，周期较短，所用试剂与材料均为微生物发酵试验常用试剂，对人体无害，对环境友好，成本低，具有较高的市场前景与经济价值。
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