基于电化学发光免疫分析的潜在指纹成像的方法

    公开(公告)号:CN103536295A

    公开(公告)日:2014-01-29

    申请号:CN201310493595.4

    申请日:2013-10-18

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 苏彬 许林茹

    Abstract: 本发明公开了一种基于电化学发光免疫分析的潜在指纹成像的方法,包括:将指印按在电极基底上,得到指印样本;往所述指印样本的指印上加入待检测目标代谢物的抗体溶液进行孵育,孵育完成后用缓冲液进行冲洗;将所述的指印样本吹干,然后向指印上加入辣根过氧化物酶标记的二抗进行孵育;或者将所述的指印样本吹干,然后向指印上加入生物素标记的二抗,孵育一段时间后冲洗、吹干指印样本,再向指印上加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶进行孵育;孵育后,用所述的缓冲液冲洗指印样本,吹干后制备得到工作电极,然后通过电化学发光成像系统采集指纹图像。本发明的方法在获取指纹图像的同时可实现潜在指纹中目标代谢物的特异性高灵敏检测。

    一种基于电化学发光标记物显现潜在指纹的方法

    公开(公告)号:CN102727213A

    公开(公告)日:2012-10-17

    申请号:CN201210204855.7

    申请日:2012-06-20

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 许林茹 李妍 苏彬

    Abstract: 本发明公开了一种基于电化学发光标记物显现潜在指纹的方法,该方法用活化的三联吡啶钌复合物为电化学发光标记物,它可以通过分子上的N-羟基琥珀酰亚胺酯与指印氨基酸中的氨基发生共价结合,从而标记并固定在指纹上;继而在一定电位下与溶液中的共反应剂(二正丁基乙醇胺)发生电化学发光反应,从而显现出指纹的纹路,包括整体形貌(一级结构)和细节特征(二级结构);本发明采用的电化学发光技术不需要外加激发光源、不存在背景光,且大大降低了发光剂的自猝灭现象,明显优于传统荧光成像法;该成像技术能够迅速获取图像,远远快于扫描电化学显微镜;使用的电化学发光共反应剂为二正丁基乙醇胺,它具有发光强度大、环境友好的特点。

    基于免疫胶体金的潜在指纹成像的方法

    公开(公告)号:CN103536297A

    公开(公告)日:2014-01-29

    申请号:CN201310493747.0

    申请日:2013-10-18

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于免疫胶体金的潜在指纹成像的方法,包括:将指印转移到基底上,得到指印样本;往所述指印样本的指印上加入纳米金标记的手指代谢物抗体溶液进行孵育,孵育完成后用缓冲液进行冲洗;将所述的指印样本干燥,然后向指印上加入银染液,避光显色后,将指印样本冲洗、干燥。本发明的方法简单、快速、灵敏,能够对指纹进行清晰的成像。

    基于化学发光酶联免疫分析的潜在指纹成像的方法

    公开(公告)号:CN103543145A

    公开(公告)日:2014-01-29

    申请号:CN201310493609.2

    申请日:2013-10-18

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 苏彬 许林茹

    Abstract: 本发明公开了一种基于化学发光酶联免疫分析的潜在指纹成像的方法,包括:将指印转移到基底上,得到指印样本;往所述指印样本的指印上加入手指代谢物的抗体溶液进行孵育,孵育完成后用缓冲液进行冲洗;将所述的指印样本干燥,然后向指印上加入辣根过氧化物酶标记的二抗进行孵育;孵育后,用所述的缓冲液冲洗指印样本,干燥后将指印样本置于化学发光反应底物溶液中,采集指纹图像。本发明的方法简单、快速、发光强度高,成像效果好。

    基于电化学发光免疫分析的潜在指纹成像的方法

    公开(公告)号:CN103536295B

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201310493595.4

    申请日:2013-10-18

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 苏彬 许林茹

    Abstract: 本发明公开了一种基于电化学发光免疫分析的潜在指纹成像的方法,包括:将指印按在电极基底上,得到指印样本;往所述指印样本的指印上加入待检测目标代谢物的抗体溶液进行孵育,孵育完成后用缓冲液进行冲洗;将所述的指印样本吹干,然后向指印上加入辣根过氧化物酶标记的二抗进行孵育;或者将所述的指印样本吹干,然后向指印上加入生物素标记的二抗,孵育一段时间后冲洗、吹干指印样本,再向指印上加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶进行孵育;孵育后,用所述的缓冲液冲洗指印样本,吹干后制备得到工作电极,然后通过电化学发光成像系统采集指纹图像。本发明的方法在获取指纹图像的同时可实现潜在指纹中目标代谢物的特异性高灵敏检测。

    一种基于电化学发光标记物显现潜在指纹的方法

    公开(公告)号:CN102727213B

    公开(公告)日:2014-06-04

    申请号:CN201210204855.7

    申请日:2012-06-20

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 许林茹 李妍 苏彬

    Abstract: 本发明公开了一种基于电化学发光标记物显现潜在指纹的方法,该方法用活化的三联吡啶钌复合物为电化学发光标记物,它可以通过分子上的N-羟基琥珀酰亚胺酯与指印氨基酸中的氨基发生共价结合,从而标记并固定在指纹上;继而在一定电位下与溶液中的共反应剂(二正丁基乙醇胺)发生电化学发光反应,从而显现出指纹的纹路,包括整体形貌(一级结构)和细节特征(二级结构);本发明采用的电化学发光技术不需要外加激发光源、不存在背景光,且大大降低了发光剂的自猝灭现象,明显优于传统荧光成像法;该成像技术能够迅速获取图像,远远快于扫描电化学显微镜;使用的电化学发光共反应剂为二正丁基乙醇胺,它具有发光强度大、环境友好的特点。

    基于免疫胶体金的潜在指纹成像的方法

    公开(公告)号:CN103536297B

    公开(公告)日:2015-06-17

    申请号:CN201310493747.0

    申请日:2013-10-18

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于免疫胶体金的潜在指纹成像的方法,包括:将指印转移到基底上,得到指印样本;往所述指印样本的指印上加入纳米金标记的手指代谢物抗体溶液进行孵育,孵育完成后用缓冲液进行冲洗;将所述的指印样本干燥,然后向指印上加入银染液,避光显色后,将指印样本冲洗、干燥。本发明的方法简单、快速、灵敏,能够对指纹进行清晰的成像。

    基于化学发光酶联免疫分析的潜在指纹成像的方法

    公开(公告)号:CN103543145B

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201310493609.2

    申请日:2013-10-18

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 苏彬 许林茹

    Abstract: 本发明公开了一种基于化学发光酶联免疫分析的潜在指纹成像的方法,包括:将指印转移到基底上,得到指印样本;往所述指印样本的指印上加入手指代谢物的抗体溶液进行孵育,孵育完成后用缓冲液进行冲洗;将所述的指印样本干燥,然后向指印上加入辣根过氧化物酶标记的二抗进行孵育;孵育后,用所述的缓冲液冲洗指印样本,干燥后将指印样本置于化学发光反应底物溶液中,采集指纹图像。本发明的方法简单、快速、发光强度高,成像效果好。

    一种基于多种电化学发光体系直接显现潜在指纹的方法

    公开(公告)号:CN102755166B

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201210204857.6

    申请日:2012-06-20

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 许林茹 李妍 苏彬

    Abstract: 本发明公开了一种基于多种电化学发光体系直接显现潜在指纹的方法,该方法以三联吡啶钌及三正丙胺为电化学发光反应体系,通过选择性地控制电极表面电化学发光的产生与否,来对电极上承载的指纹进行显现。该方法简单、快速,对样本无破坏性、无需进行前处理或后处理;既可用于新鲜指印样本,也可用于陈旧样本;同时适用于其他电化学发光反应体系,并能用于多种客体上指纹的显现。

    一种基于多种电化学发光体系直接显现潜在指纹的方法

    公开(公告)号:CN102755166A

    公开(公告)日:2012-10-31

    申请号:CN201210204857.6

    申请日:2012-06-20

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 许林茹 李妍 苏彬

    Abstract: 本发明公开了一种基于多种电化学发光体系直接显现潜在指纹的方法,该方法以三联吡啶钌及三正丙胺为电化学发光反应体系,通过选择性地控制电极表面电化学发光的产生与否,来对电极上承载的指纹进行显现。该方法简单、快速,对样本无破坏性、无需进行前处理或后处理;既可用于新鲜指印样本,也可用于陈旧样本;同时适用于其他电化学发光反应体系,并能用于多种客体上指纹的显现。

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