公开(公告)号：CN118961660A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202411017315.7

申请日：2024-07-26

申请人： 济南微生态生物医学省实验室

发明人： 杨佳鹏 ,  张玉 ,  董鹏 ,  江春平 ,  曹毅 ,  薛斌

IPC分类号： G01N21/64 ,  G01L1/24

摘要： 本发明公开了一种基于牵引力显微镜(TFM)高通量测量细胞力的方法，包括：修饰水凝胶基底的盖玻片、制备含荧光微珠的水凝胶、采集荧光微珠分布图像以及量化和统计分析细胞牵引力。细胞牵引力(CTFs)由粘附细胞产生，参与调节细胞伸展、迁移和分化等过程。准确测量CTFs对于理解组织和器官发育、衰老和病变等生理过程至关重要。本发明提供了一种改进的细胞牵引力显微镜系统，通过使用嵌入荧光微珠的水凝胶基质记录细胞粘附前后的位移变化，并通过修饰了甲基丙烯酸酯基团的盖玻片增强荧光微珠水凝胶基质与细胞培养皿之间的连接。此外，开发了基于Python的脚本程序(pyFTTC)进行自动化、高通量数据分析。实现自动化、高通量连续时间测量细胞力。

公开(公告)号：CN118834406A

公开(公告)日：2024-10-25

申请号：CN202411012280.8

申请日：2024-07-26

申请人： 济南微生态生物医学省实验室

发明人： 杨佳鹏 ,  张玉 ,  姚文 ,  江春平 ,  曹毅 ,  薛斌

IPC分类号： C08J3/075 ,  C08L71/02 ,  C08L89/00 ,  C07K14/195 ,  C12N15/70 ,  C12N5/00 ,  A61L27/26 ,  A61L27/52 ,  A61K9/06 ,  A61K47/42 ,  A61K47/18 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种快速光响应可逆刚度变化蛋白水凝胶，由光活化黄蛋白PYP突变体与8臂‑马来酰亚胺‑聚乙二醇（8‑armed PEG‑Mal）聚合而成。对原有的野生型光活化黄蛋白（PYP）序列进行位点突变和序列扩展，突变体蛋白能够正常折叠及表达的同时，具有能响应蓝光照射发生快速可逆构象变化的能力；突变位点和扩展序列暴露的半胱氨酸残基中的巯基能与8臂‑马来酰亚胺‑聚乙二醇末端的马来酰亚胺基团反应，制得快速光响应可逆刚度变化蛋白水凝胶；通过控制8臂‑马来酰亚胺‑聚乙二醇与突变体蛋白的浓度来影响蛋白水凝胶交联速度和初始机械性能，通过控制蓝光照射的存在和消失可以调制蛋白水凝胶成胶后的机械性能。可以广泛应用于细胞培养、药物释放和组织工程。