公开(公告)号：CN108300762A

公开(公告)日：2018-07-20

申请号：CN201810193252.9

申请日：2018-03-09

Applicant: 河南省种牛遗传性能测定中心 ,  西北农林科技大学

Inventor： 白跃宇 ,  谭旭信 ,  魏金销 ,  金喜新 ,  韩明鹏 ,  陈美凯 ,  郭利亚 ,  曹斌云 ,  王沛捷

IPC: C12Q1/66 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种筛选miR-29靶基因的方法，该方法以山羊卵巢cDNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用PTX3引物在PCR条件下进行扩增PTX3基因3'UTR区；构建双荧光素酶报告系统，检测荧光素酶活性，结果显示，miR-29降低了荧光素酶的活性，初步确定PTX3为miR-29的靶基因；采用RT-qPCR和Western blot方法验证miR-29对PTX3基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果显示：miR-29可以抑制PTX3基因在mRNA和蛋白水平上的表达，进一步确定miR-29可与PTX33'UTR结合，PTX3是miR-29的靶基因，为研究miR-29对奶山羊卵巢发育和产羔性状的调控作用奠定了基础。