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公开(公告)号：CN116621760A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202310481984.9
申请日：2023-04-28
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
IPC分类号： C07D209/20
摘要： 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种细胞培养基用L‑色氨酸的纯化方法。本发明对含有L‑色氨酸的发酵液经过陶瓷膜、纳滤、浓缩得到色氨酸结晶浆料；将其进行降温结晶处理，得到湿晶体和一次母液；得到的湿晶体经重溶后色谱分离、炭脱精制、浓缩结晶、离心获得精制色氨酸晶体和二次母液。精制色氨酸晶体经过醇溶、离心、烘干得高纯色氨酸成品。该方法具有具有操作性强、纯度高、反应条件温和、低碳环保等优点，克服了现有技术在制取高纯色氨酸时杂质去除不彻底、高浓度废水量大等缺点，产品可完全达到进口默克sigma质量标准。
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公开(公告)号：CN109609580B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN201811602382.X
申请日：2018-12-26
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
摘要： 本发明提供一种核黄素的发酵培养基及其发酵方法，所述发酵培养基中添加有叶酸和氟化钠，该发酵培养基添加叶酸和氟化钠为菌体代谢提供缺乏的营养物质，解除糖酵解途径中对原料的浪费，促进HMP途径的代谢强度，有利于代谢目标产物的高效合成，利用该发酵培养基的核黄素的发酵方法为：将发酵种子液转接至装有核黄素的发酵培养基的发酵罐中培养60～70h，且在发酵罐中分阶段控制发酵液中葡萄糖的浓度，前40h维持葡萄糖浓度为1.0‑1.5%，40h至下罐维持葡萄糖浓度0.5‑1.0%，保证各阶段适当的葡萄糖浓度，降低葡萄糖浓度过高或过低对菌体代谢核黄素的影响，利用该方法进行核黄素发酵，可以使核黄素的产量提高至34.6g/L，与未使用该方法相比产量提高76.53%，发酵周期缩短，减少成本。
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公开(公告)号：CN109609580A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201811602382.X
申请日：2018-12-26
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
摘要： 本发明提供一种核黄素的发酵培养基及其发酵方法，所述发酵培养基中添加有叶酸和氟化钠，该发酵培养基添加叶酸和氟化钠为菌体代谢提供缺乏的营养物质，解除糖酵解途径中对原料的浪费，促进HMP途径的代谢强度，有利于代谢目标产物的高效合成，利用该发酵培养基的核黄素的发酵方法为：将发酵种子液转接至装有核黄素的发酵培养基的发酵罐中培养60～70h，且在发酵罐中分阶段控制发酵液中葡萄糖的浓度，前40h维持葡萄糖浓度为1.0-1.5%，40h至下罐维持葡萄糖浓度0.5-1.0%，保证各阶段适当的葡萄糖浓度，降低葡萄糖浓度过高或过低对菌体代谢核黄素的影响，利用该方法进行核黄素发酵，可以使核黄素的产量提高至34.6g/L，与未使用该方法相比产量提高76.53%，发酵周期缩短，减少成本。
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公开(公告)号：CN104447493A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410666529.7
申请日：2014-11-20
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
IPC分类号： C07D209/20
CPC分类号： C07D209/20
摘要： 本发明公开一种L-色氨酸高效膜提取方法，包括以下步骤：先将发酵完成的L-色氨酸发酵液转移至发酵液储罐中，然后将发酵液输送至陶瓷膜过滤器中进行过滤，过滤过程中，控制过滤液的流速使陶瓷膜的跨膜压力差不超过0.4MPa，经过过滤的色氨酸清液输送至清液罐中保存，备用；当发酵液储罐中的发酵液的含量达到4%以下时停止过滤，发酵液储罐中为菌渣，备用；将发酵液储罐中的菌渣打入菌渣罐，然后向菌渣罐内加入聚凝剂，待混合料渣成粘稠状后打入板框压滤机，经板框压滤后得到滤饼和滤液，滤饼为固体蛋白，滤液作为透析水回收至发酵液储罐重复利用。该方法能够有效减少陶瓷膜运行时间，提高发酵上罐批次，降低生产成本，降低污水排放量。
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公开(公告)号：CN116574061A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202310481983.4
申请日：2023-04-28
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
IPC分类号： C07D233/64
摘要： 本发明涉及一种分离纯化细胞培养基用L‑组氨酸的方法，属于生物医药领域。本发明将发酵液经过陶瓷膜将蛋白分离出来，获得的清液经过色谱纯化、纳滤、脱色后制得粗品，重结晶而得到产品。用本发明方法得到的产品，比旋光度可达到+12.1°~+12.8°，含量达到99.8%~101.5%，可完全达到进口默克sigma质量标准。该方法具有条件温和、操作简便、分离步骤少、选择性好，清洁生产等特点，克服了现有技术存在的收率不高、污水排量大及生产强度大的缺点，并且使L‑组氨酸的收率和质量显著提高。
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公开(公告)号：CN104447493B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201410666529.7
申请日：2014-11-20
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
IPC分类号： C07D209/20
摘要： 本发明公开一种L-色氨酸高效膜提取方法，包括以下步骤：先将发酵完成的L-色氨酸发酵液转移至发酵液储罐中，然后将发酵液输送至陶瓷膜过滤器中进行过滤，过滤过程中，控制过滤液的流速使陶瓷膜的跨膜压力差不超过0.4MPa，经过过滤的色氨酸清液输送至清液罐中保存，备用；当发酵液储罐中的发酵液的含量达到4%以下时停止过滤，发酵液储罐中为菌渣，备用；将发酵液储罐中的菌渣打入菌渣罐，然后向菌渣罐内加入聚凝剂，待混合料渣成粘稠状后打入板框压滤机，经板框压滤后得到滤饼和滤液，滤饼为固体蛋白，滤液作为透析水回收至发酵液储罐重复利用。该方法能够有效减少陶瓷膜运行时间，提高发酵上罐批次，降低生产成本，降低污水排放量。
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公开(公告)号：CN104478786B
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201410666756.X
申请日：2014-11-20
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
IPC分类号： C07D209/20 , A23K20/142
CPC分类号： Y02P20/123
摘要： 本发明公开一种L‑色氨酸膜提取节能系统，包括通过管道依次连接的发酵液储罐、陶瓷膜过滤器和清液罐，发酵液储罐上连接有透析水添加装置，所述的发酵液储罐上还设置有L‑色氨酸浓度检测口，陶瓷膜过滤器设有能够根据L‑色氨酸浓度控制其运行的控制器，所述的发酵液储罐的底部还通过离心泵连接有菌渣罐，菌渣罐内装有聚凝剂，且菌渣罐通过菌渣泵与板框压滤机连通，板框压滤机的滤液排出管与发酵液储罐的顶部连接并连通。该系统能够有效减少陶瓷膜运行时间，提高发酵上罐批次，降低生产成本，降低污水排放量。
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公开(公告)号：CN109370966B
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201811215068.6
申请日：2018-10-18
申请人： 天津科技大学 , 河南巨龙生物工程股份有限公司
摘要： 本发明提供一种用于L‑茶氨酸生产的基因工程菌及其发酵方法，在大肠杆菌(Escherichia coli W3110)基因组上单拷贝来源于T7噬菌体的RNA聚合酶基因T7RNAP，该基因由木糖启动子控制；双拷贝来源于Methylovorus mays的γ‑谷氨酰甲胺合成酶基因gmas，该基因由T7启动子控制；敲除木糖操纵子阻遏蛋白基因xylR；敲除琥珀酰CoA合成酶基因sucCD。使用本基因工程菌发酵L‑茶氨酸的产量可达40g/L，糖酸转化率可达到25％。本发明提供的L‑茶氨酸生产方法具有原料价格低廉，周期短，操作简便，绿色环保，产率较高的优点，具有良好的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN110759849A
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201911126213.8
申请日：2019-11-18
申请人： 河南巨龙生物工程股份有限公司
IPC分类号： C07D209/20
摘要： 本发明属于色氨酸生产技术领域，具体涉及一种色氨酸二次母液回收工艺。该工艺的主要步骤是色氨酸二次母液升温-加活性炭-过滤-色谱柱吸附洗脱-蒸发浓缩-结晶-离心-烘干得到成品。本发明的工艺可以实现随时对色氨酸二次母液的回收处理，最终色氨酸产品纯度在98%左右。
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公开(公告)号：CN109370966A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811215068.6
申请日：2018-10-18
申请人： 天津科技大学 , 河南巨龙生物工程股份有限公司
摘要： 本发明提供一种用于L-茶氨酸生产的基因工程菌及其发酵方法，在大肠杆菌(Escherichia coli W3110)基因组上单拷贝来源于T7噬菌体的RNA聚合酶基因T7RNAP，该基因由木糖启动子控制；双拷贝来源于Methylovorus mays的γ-谷氨酰甲胺合成酶基因gmas，该基因由T7启动子控制；敲除木糖操纵子阻遏蛋白基因xylR；敲除琥珀酰CoA合成酶基因sucCD。使用本基因工程菌发酵L-茶氨酸的产量可达40g/L，糖酸转化率可达到25％。本发明提供的L-茶氨酸生产方法具有原料价格低廉，周期短，操作简便，绿色环保，产率较高的优点，具有良好的工业应用价值。
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