公开(公告)号：CN110305890A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910589799.5

申请日：2019-07-02

Applicant: 河南城建学院

Inventor： 王莲哲 ,  洪军 ,  谢朝晖 ,  柳静 ,  胡建业 ,  刘俊红 ,  时宁 ,  任亚彬 ,  左晓洁

IPC: C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C07K7/08 ,  C07K14/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种新型5种抗菌肽串联表达重组工程菌构建方法及其应用，通过将5种不同的广谱抗菌肽串联，中间插入甲酸切割位点，构建到酵母分泌性表达载体pPIC9k中，并经酶切线性化后转化毕赤酵母感受态细胞获得。重组工程菌插入氨基酸序列特点，所有氨基酸用毕赤酵母偏好性密码子进行替换，以保证在毕赤酵母中的最优表达。插入序列为5种不同的广谱抗菌肽串联表达，中间插入甲酸切割位点。本发明根据毕赤酵母的密码子偏爱性对5种新型抗菌肽进行优化并串连，然后构建真核重组表达载体，达到5种不同抗菌肽在毕赤酵母中的串联表达，提高发酵产物的表达量及活性。