公开(公告)号：CN109609691A

公开(公告)日：2019-04-12

申请号：CN201811575572.7

申请日：2018-12-22

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 郑兰兰 ,  魏战勇 ,  王松山 ,  朱静静 ,  王盼 ,  梁青青 ,  李炳晓

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明涉及生物分子学领域，特别是指猪δ冠状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法及其应用。设计一对引物用于扩增PDCoV M基因。将测序正确的基因片段克隆入pMD18-T载体，并构建重组质粒作为标准品模板，在M基因序列内，设计合成一对特异性引物与TaqMan探针，通过反应条件和反应体系的优化，建立快速检测PDCoV的TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法，并对其敏感性、特异性与重复性进行验证。本发明能有效扩增1.0×101-1.0×109拷贝/μL的PDCoV标准质粒以及其它阳性样品，并且呈现良好的线性关系。该方法的检测灵敏度为1.0×101拷贝/μL；该方法具有良好的特异性、重复性。