公开(公告)号：CN113046450A

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN202110288664.2

申请日：2021-03-17

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 李继东 ,  冯建灿 ,  陈鹏 ,  李奇乘 ,  杨琦琪 ,  叶霞 ,  郑先波 ,  谭彬

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a点切割可视化检测植原体的方法，该方法通过设计针对植原体16SrDNA序列保守区域的crRNA，激活CRISPR/Cas12a的蛋白的切口功能实现对linker‑arm DNA的切割，以产生所需要的断裂DNA片段，并利用纳米金显色技术成功检测出多种植原体，这对实现植原体田间快速可视化检测具有重大意义。本发明具有成本低，操作简便，效率高，灵敏度高和特异性强等特性，并且通过显色即可肉眼判断，显色反应效果持久明显。减少了对实验室大型仪器和精密信号采集仪器的依赖，为植原体的检测提供了新思路和新选择。

公开(公告)号：CN113046450B

公开(公告)日：2024-05-24

申请号：CN202110288664.2

申请日：2021-03-17

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 李继东 ,  李奇承 ,  冯建灿 ,  陈鹏 ,  杨琦琪 ,  叶霞 ,  郑先波 ,  谭彬

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a点切割可视化检测植原体的方法，该方法通过设计针对植原体16SrDNA序列保守区域的crRNA，激活CRISPR/Cas12a的蛋白的切口功能实现对linker‑arm DNA的切割，以产生所需要的断裂DNA片段，并利用纳米金显色技术成功检测出多种植原体，这对实现植原体田间快速可视化检测具有重大意义。本发明具有成本低，操作简便，效率高，灵敏度高和特异性强等特性，并且通过显色即可肉眼判断，显色反应效果持久明显。减少了对实验室大型仪器和精密信号采集仪器的依赖，为植原体的检测提供了新思路和新选择。