公开(公告)号：CN108950073A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810869083.6

申请日：2018-08-02

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 张晓婷 ,  谢源 ,  张艳丽 ,  孙柄剑 ,  周琳 ,  李洪连

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/682

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/682 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2563/137

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测小麦矮缩病毒DNA的方法，其包括以下步骤：提供特异性识别待测小麦矮缩病毒DNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为一条包含G‑四链体合成模板的核苷酸序列；将所述DNA分子机器与待测样品相混合；提供DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器，发生DNA新链合成、形成单链切口和不断剥离产生富G基因片段的系列反应；提供硫黄素ThT诱导产生G‑四链体结构，并与G‑四链体结合产生荧光；检测和记录该荧光。本发明用于将样品中的小麦矮缩病毒DNA信号转化为G‑四链体，在常温下可实现G‑四链体的不断扩增，将小麦矮缩病毒DNA信高度放大，实现高灵敏度的核酸快速定性分析测定。所述方法特异性强，无需使用价格昂贵或体积庞大的精密温控设备，便于进行快速检测和分析。

公开(公告)号：CN108949915A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810869124.1

申请日：2018-08-02

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 高飞 ,  张晓婷 ,  周琳 ,  许娟 ,  杜鹏强 ,  张艳丽 ,  谢源 ,  李洪连

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/04

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2521/101 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2525/173 ,  C12Q2521/301

Abstract: 本发明涉及一种快速检测镰刀菌DNA的方法，其包括以下步骤：S1：提供特异性识别镰刀菌DNA的DNA分子机器，所述DNA分子机器为一条包含G‑四链体互补序列的核苷酸序列；S2：将所述DNA分子机器与待测样品相互混合；S3：引入DNA聚合酶和切口酶，作用于DNA分子机器，发生DNA扩增反应；S4：引入硫黄素T，诱导产生G‑四链体结构，并与G‑四链体结合，产生荧光；检测和记录该荧光。本发明可将疑似含有镰刀菌DNA的小麦待测样品中的核酸信号转化为G‑四链体，在常温恒温下即可实现G‑四链体的不断扩增，将核酸的信号高度放大，通过硫黄素T结合G‑四链体产生稳定的荧光信号，从而实现高灵敏度的核酸快速定性分析测定。

公开(公告)号：CN109097447A

公开(公告)日：2018-12-28

申请号：CN201810869123.7

申请日：2018-08-02

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 张晓婷 ,  张芳 ,  张艳丽 ,  杜鹏强 ,  高飞 ,  谢源 ,  周琳 ,  李洪连

IPC: C12Q1/6825 ,  C12Q1/6844

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种DNA分子机器，其为一条核苷酸序列，包括以下区域：靶序列识别区、稳定区、切口酶识别区和G-四链体合成模板。所述靶序列识别区、稳定区、切口酶识别区和G-四链体合成模板从核苷酸序列的3’端到5’端依次排列。本发明用于将样品中的核酸信号转化为G-四链体，在常温下可实现G-四链体的不断扩增，将核酸的信号高度放大，实现高灵敏度的核酸快速定性和半定量分析测定。