公开(公告)号：CN111549158A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010510791.8

申请日：2020-06-08

Applicant: 河北工程大学

Inventor： 汪庆 ,  郭绍月 ,  王丽涛 ,  杨卫华 ,  杨光 ,  鲍玲玲 ,  罗景辉

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 一种检测大气环境中一类整合子基因intI1的方法。该方法包括：将已知浓度的整合子基因intI1标准样品稀释至不同浓度，作为模板进行PCR反应提取DNA，以此DNA为模板，利用设计的正向引物和反向引物对此DNA进行定量PCR扩增，并记录循环数；将获得的循环数，根据定量PCR测定目的基因intI1质粒标准样品的标准曲线；运用10倍梯度稀释法，利用已知浓度模板起始拷贝数标准样品做出目的基因的标准曲线；确定大气环境样品中一类整合子基因intI1的循环数，并根据标准曲线计算基因intI1的含量。本发明提供的目的基因引物序列和方法可以对大气环境样品中一类整合子基因intI1进行快速精确定量。

公开(公告)号：CN109825557A

公开(公告)日：2019-05-31

申请号：CN201910287733.0

申请日：2019-04-11

Applicant: 河北工程大学

Inventor： 汪庆 ,  侯泽林 ,  王丽涛 ,  杨光 ,  张海霞 ,  齐丽英

IPC: C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种检测大气环境中磺胺类耐药基因sulI的方法。该方法包括以下两个内容：(1)提取目标大气环境样品中的DNA，以此获取的DNA为模板，用本发明设计的正向引物和反向引物对(SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2)提取的DNA样品为模板，利用定量PCR扩增技术获得目的基因的PCR产物；(2)运用步骤(1)中得到的PCR扩增循环数，依据定量PCR测定目的基因sulI质粒标准品的标准曲线，得到目标大气环境样品中磺胺类耐药基因sulI的含量。本发明提供的目的基因引物序列和方法可以对大气环境样品中磺胺类耐药基因sulI进行快速精确定量。

公开(公告)号：CN111607655A

公开(公告)日：2020-09-01

申请号：CN202010510793.7

申请日：2020-06-08

Applicant: 河北工程大学

Inventor： 汪庆 ,  梁海崟 ,  杨光 ,  王丽涛 ,  杨卫华 ,  侯立泉 ,  任晓芬

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/10 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种检测大气环境中四环素类耐药基因tetA的方法。包括：(1)将已知浓度的四环素类耐药基因tetA的标准样品稀释至不同浓度，作为模板进行PCR反应，利用设计引物序列对模板DNA进行定量PCR扩增，记录得到的循环数；(2)运用10倍梯度稀释法，利用已知浓度模板起始拷贝数标准样品做出目的基因的标准曲线；(3)按照步骤(1)方法确定大气环境样品中四环素类耐药基因tetA的循环数，利用步骤(2)绘制的标准曲线，计算得到目标基因tetA的含量。本发明使用定量PCR技术即可快速精确地检测到大气环境中待测样品中四环素耐药基因tetA的浓度含量。