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公开(公告)号:CN118976104A
公开(公告)日:2024-11-19
申请号:CN202411051506.5
申请日:2024-08-01
Applicant: 河北农业大学 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC: A61K39/39 , A61P37/04 , A61K39/245 , A61P31/22
Abstract: 本发明涉及疫苗佐剂技术领域,具体公开一种复合疫苗佐剂、含该佐剂的疫苗及其制备方法和应用。所述复合疫苗佐剂包括猪GM‑CSF蛋白和黄芪多糖,其中,所述猪GM‑CSF蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的复合疫苗佐剂,能够有效刺激机体体液免疫应答并产生高水平的特异性gB蛋白抗体,同时,还可引起更强的CD4+和CD8+T细胞增殖反应,且可诱导机体产生较高水平的中和抗体,且最高中和效价为1:128,可有效提高灭活疫苗的体液免疫应答,显著增强疫苗免疫效果,且疫苗佐剂原料易得,稳定性好,副作用小,为疫苗提供了新的佐剂选择,推广应用价值较高。
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公开(公告)号:CN113308480A
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202110673091.5
申请日:2021-06-17
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种A型塞内卡病毒SVA/HeB全长感染性cDNA克隆及其制备方法与应用,属于病毒技术领域。本发明所用拯救系统在A型塞内卡病毒5’端上游引入CMV增强子、β‑actin启动子和核酶序列;在3’端下游引入核酶和终止子序列,通过RT‑RCR方法分段扩增SVA全长基因组片段,利用同源重组技术克隆至pOK12载体,构建含SVA/HeB全长cDNA的重组质粒。基于感染性cDNA克隆拯救得到的病毒为深入研究SVA的生物学特性、复制机制、致病机理及相关疫苗的研发奠定了基础,具有重要的科学应用价值。
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公开(公告)号:CN117947056A
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202410120699.9
申请日:2024-01-29
Applicant: 河北农业大学 , 石家庄石牧药业有限公司
IPC: C12N15/35 , C12N15/11 , C07K14/015 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及生物免疫技术领域,提出了NGPV VP2单克隆抗体及其制备方法和应用。所述NGPV VP2单克隆抗体,重链型的重链恒定区为IgG1;轻链恒定区为Kappa型,腹水抗体效价不低于8×106;所述制备方法包括以重组蛋白制备免疫抗原;使用免疫抗原免疫小鼠;融合小鼠的免疫脾细胞与骨髓瘤细胞,获得杂交瘤细胞;对杂交瘤细胞的上清液进行特异性筛选,对检测阳性的细胞进行克隆化培养,获得单克隆抗体杂交瘤细胞株;将单克隆抗体杂交瘤细胞株注射于小鼠腹腔得到单克隆抗体。通过上述技术方案,开展单克隆抗体效果评价,利用单克隆抗体筛选出位于VP2的抗原表位,为鸭短喙‑侏儒综合征防治提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN117924520A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202410117541.6
申请日:2024-01-29
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明涉及干扰素制剂技术领域,具体公开一种重组猪α+γ干扰素融合蛋白及其制备方法和应用。本发明将基因序列优化后的猪α干扰素与猪γ干扰素通过特定的柔性连接体进行串联融合表达,并克隆到pET‑28a载体上,减少了表达蛋白对细胞的毒性作用;将所得重组表达载体转移到BL21(DE3)上,提高了表达外源蛋白的效率和稳定性;然后筛选出对卡那霉素具有抗性的基因工程菌,用IPTG成功诱导其表达干扰素蛋白,得到大量表达外源蛋白;最后通过镍‑琼脂糖凝胶树脂柱进行纯化,复性后得到高纯度且同时具有优异的抗病毒性能和免疫调节功能的重组猪α+γ干扰素融合蛋白,为增强猪的抗病毒能力和免疫调节能力提供了更好的保障。
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公开(公告)号:CN119818449A
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202510036460.8
申请日:2025-01-09
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明提供了一种负载重组牛干扰素α/γ壳聚糖纳米颗粒(CS‑TPP‑rBoIFNα/γNPs)的制备方法,制备方法包括:重组牛干扰素α/γ(rBoIFNα/γ)的表达与纯化、rBoIFNα/γ的复性和CS‑TPP‑rBoIFNα/γNPs的制备。还提供了应用,用于制备防治BVDV引起的犊牛腹泻药物。本发明制备的CS‑TPP‑rBoIFNα/γNPs尺寸较小呈均匀分布,在生物体液中可持续释放96h;且CS‑TPP‑rBoIFNα/γNPs包封效果较好,封装效率和负载效率可达76.3%、67.2%;在小鼠体内应用发现CS‑TPP‑rBoIFNα/γNPs能够显著提高rBoIFNα/γ的抗病毒活性。
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公开(公告)号:CN117051044A
公开(公告)日:2023-11-14
申请号:CN202310903782.9
申请日:2023-07-21
Applicant: 河北农业大学
IPC: C12N15/86 , C12N15/34 , C12N15/41 , C12N7/01 , A61K39/125 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/14 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种携带外源片段的重组脑心肌炎病毒BD2株全长感染性克隆的构建方法及应用。该构建方法以脑心肌炎病毒BD2株全长cDNA感染性克隆为骨架,在所述脑心肌炎病毒BD2株L蛋白的第5、6位氨基酸之间分别插入长度小于483bp的PCV3Cap蛋白抗原表位片段,成功得到重组脑心肌炎病毒BD2株全长感染性克隆,该稳定携带PCV3Cap蛋白抗原表位片段的重组脑心肌炎病毒BD2株全长感染性克隆可以成功拯救出具有感染性的重组病毒,可用于制备多价疫苗,该构建方法还可以为构建携带其他外源基因的全长感染性克隆提供借鉴。
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公开(公告)号:CN116082527A
公开(公告)日:2023-05-09
申请号:CN202310267700.6
申请日:2023-03-20
Applicant: 河北瑞兰生物科技有限公司 , 河北伯瑞动物药业有限公司 , 河北农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/66 , C12N1/21 , A61K38/21 , A61K38/20 , A61P31/00 , A61P31/12 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体公开一种羊γ干扰素与羊白介素2融合蛋白及其编码基因和应用。所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的融合蛋白兼具羊γ干扰素与羊白介素2的双重生物学活性,不仅具有广谱抗病毒作用,还提高了羊自身的免疫应答,且稳定性好,在高温和酸碱环境中仍然具有抗病毒活性。同时,该融合蛋白还具有较高的表达水平,能够有效延长干扰素在体内的停留时间,提高干扰素的半衰期。
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公开(公告)号:CN113308480B
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202110673091.5
申请日:2021-06-17
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种A型塞内卡病毒SVA/HeB全长感染性cDNA克隆及其制备方法与应用,属于病毒技术领域。本发明所用拯救系统在A型塞内卡病毒5’端上游引入CMV增强子、β‑actin启动子和核酶序列;在3’端下游引入核酶和终止子序列,通过RT‑RCR方法分段扩增SVA全长基因组片段,利用同源重组技术克隆至pOK12载体,构建含SVA/HeB全长cDNA的重组质粒。基于感染性cDNA克隆拯救得到的病毒为深入研究SVA的生物学特性、复制机制、致病机理及相关疫苗的研发奠定了基础,具有重要的科学应用价值。
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公开(公告)号:CN118773105A
公开(公告)日:2024-10-15
申请号:CN202410906735.4
申请日:2024-07-08
Applicant: 河北农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种鸭短喙与侏儒综合征病毒样颗粒及其制备方法与应用。本发明通过构建表达鸭短喙与侏儒综合征(SBDS)结构蛋白VP2的工程菌株,令分子伴侣蛋白与结构蛋白共表达实现了SBDS结构蛋白VP2在大肠杆菌系统中的可溶性表达,制备出具有免疫原性的结构蛋白VP2。后将工程菌株经诱导培养、纯化、自组装制得所述SBDS病毒样颗粒。进一步将SBDS病毒样颗粒制备为疫苗,经证实该疫苗可以有效的保护雏鸭免受NGPV的攻击。
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公开(公告)号:CN118496350A
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410617593.X
申请日:2024-05-17
Applicant: 河北国安生物工程有限公司 , 河北农业大学
IPC: C07K16/08 , C07K14/01 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了猪圆环病毒3型Cap单克隆抗体及其制备方法与应用。PCV3Cap4株单克隆抗体的重链均为IgG2b型,轻链均为κ链,在1.25×104‑1.024×105,其中7E3腹水在102400倍稀释时仍可以检测到抗体阳性,具有良好的反应性。制备方法包括以重组蛋白制备免疫抗原;使用免疫抗原免疫小鼠;融合小鼠的免疫脾细胞与骨髓瘤细胞,获得杂交瘤细胞;对杂交瘤细胞的上清液进行特异性筛选,对检测阳性的细胞进行克隆化培养,获得单克隆抗体杂交瘤细胞株;将单克隆抗体杂交瘤细胞株注射于小鼠腹腔得到单克隆抗体。通过上述技术方案,开展单克隆抗体效果评价,利用单克隆抗体筛选出位于Cap的抗原表位,为猪圆环病毒3型防治提供技术支撑。
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