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公开(公告)号：CN113564102A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110966404.6
申请日：2021-08-23
Applicant: 江西农业大学
Abstract: 本发明适用于生物技术领域，提供了一种鸡胚原代肝细胞的分离培养方法，包括步骤如下：步骤一：将孵化至12日龄的鸡胚经75%乙醇浸泡消毒后放入无菌操作台；步骤二：无菌条件下取出步骤一中鸡胚，将鸡胚断头处理后置于含有4℃预冷的0.01 mol/L磷酸缓冲盐溶液中；步骤三：对步骤二中处理后的鸡胚进行两次清理后，使鸡胚表面的血液清洗掉。采用SPF级鸡胚，在操作台中即可完成肝脏的分离，在操作简便的同时又不易出现细菌污染。方法中利用胶原酶对肝进行组织消化，相较于传统的胰蛋白酶消化法，对细胞造成的损伤较小且胶原酶造成的损伤是可逆性的，能获得的生物活性较好的肝细胞。
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