一种基于金银纳米星“尖峰暴露”检测抗生素的方法

    公开(公告)号:CN113218939B

    公开(公告)日:2022-11-29

    申请号:CN202110440402.3

    申请日:2021-04-23

    摘要: 本发明公开了一种基于金银纳米星“尖峰暴露”检测抗生素的方法。属于生物检测技术领域,具体步骤:Ni‑Fe LDOs的制备;将单链DNA和Ni‑Fe LDOs混合;得到修饰有单链DNA的Ni‑Fe LDOs;合成金纳米星材料,将银包覆其表面,得到金银纳米星材料;将其他DNA链加入到待检测的抗生素样本中,混合孵育;得到含有DNA/Ni‑Fe LDOs复合材料的混合溶液;加入双氧水、TMB、浓盐酸及金银纳米星材料,最后对信号进行记录。本发明包括CHA、HCR和磁分离这三种,具有成本低、灵敏度高及操作简单等优势;另外,本发明在食品质量控制、药物质量检测和体内抗生素残留分析等领域具有潜在的应用价值。

    由miRNA-211和H2S协同触发的3D DNA网络结构及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114958968A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210620605.5

    申请日:2022-06-01

    摘要: 本发明公开了由miRNA‑211和H2S协同触发的3D DNA网络结构及其制备方法和应用,3D DNA network结构包括DNA‑立方体框架、Ag NPs和由miRNA‑211作为引发链形成的长双链DNA轨道;其中,Ag NPs嵌入DNA‑立方体框架内,并与长双链DNA轨道自组装形成网络结构。与现有技术相比,本发明所述结构首次提出应用miRNA‑211和H2S作为检测CRC的生物标志物组,对H2S的检测范围为0.05‑10μM,LOD低至4.78nM,并成功应用于人结肠癌HCT 116细胞成像,实现了H2S的快速分析检测和CRC细胞成像,具有良好的特异性和实用性。本方法为CRC的早期诊断与追踪提供了一种灵敏度高、特异性强的新策略。

    DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法

    公开(公告)号:CN112359094A

    公开(公告)日:2021-02-12

    申请号:CN202010729287.7

    申请日:2020-07-27

    IPC分类号: C12Q1/682

    摘要: 本发明公开了一种DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法,包括以下步骤:(1)制备Fe3O4纳米片;(2)在Fe3O4纳米片上修饰单链DNA得到Fe3O4/ssDNA;(3)制备超支化DNA结构样品,将超支化DNA结构样品与Fe3O4/ssDNA混合反应,得到DNA/Fe3O4网状结构;(4)将DNA/Fe3O4网状结构所在体系作为水相,和有机相混合,将带有萃取液滴的磁性棒浸入有机相,萃取DNA/Fe3O4网状结构后取出,利用紫外‑可见光谱仪对发生催化显色反应的液滴进行监测,分析紫外‑可见光谱数据即得待测样品中目标核酸的含量。该方法大大降低了核酸的检出限,实用性高,对于microRNA‑122的检出限低至0.147aM,对H‑DNA的检出限低至0.34aM,线性范围分别为0.5aM至1pM以及1aM至1pM(r2>0.995),利用单滴微萃取技术,检测效率高,操作简单,成本低。

    一种通过无溶剂单滴磁富集-分散固相萃取法检测抗生素的方法

    公开(公告)号:CN113866136A

    公开(公告)日:2021-12-31

    申请号:CN202110665406.1

    申请日:2021-06-16

    IPC分类号: G01N21/64 G01N1/38 G01N1/34

    摘要: 本发明公开了一种通过无溶剂单滴磁富集‑分散固相萃取法检测抗生素的方法。步骤:将DNA发夹修饰的磁性Fe3O4纳米片(NST)分散在样品溶液中;以CAP引发扩增反应并构筑分支状的G‑四链体;用条状磁棒将表面含有G‑四链体/原卟啉IX复合产物的Fe3O4 NST从样品溶液中分离,同时在磁棒底部形成一滴富集表面修饰有G‑四链体/原卟啉IX复合产物的Fe3O4 NST的样品溶液;通过nanodrop平台直接检测液滴中G‑四链体/原卟啉IX的荧光信号。本发明实现了将带有信号的Fe3O4从400μL的样品溶液中迅速转移至体积为4μL的液滴中,实现了较高富集倍数果,具有非常高的检测抗生素的灵敏度。

    一种基于DNA/Ni-Fe LDO立方体网状结构超灵敏检测卡那霉素的方法

    公开(公告)号:CN113419057A

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN202110599570.7

    申请日:2021-05-31

    IPC分类号: G01N33/53 G01N21/78 C12Q1/682

    摘要: 本发明公开了一种基于DNA/Ni‑Fe LDO立方体网状结构超灵敏检测卡那霉素的方法。属于生物检测技术领域,操作步骤:通过适配体高特异性识别触发的三维Ni‑Fe LDO/DNA网络的形成来检测卡那霉素;经过XPS分析,证明Ni‑FeLDO中的Ni和Fe元素将与其表面上的G‑四分体配位结合,并在催化氧化过程中,G‑四链体上的电子被转移到具有更强的类过氧化物酶样催化活性的Ni‑FeLDO中的Ni和Fe元素中;从而测得的检测限(LOD)降至0.31fM(S/N=3)。另外,本发明能够准确地检测出牛奶和尿液实际样品中的残留的卡那霉素含量;对实际样品中卡那霉素残留的检测具有潜在应用价值。

    一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行检测的液相色谱法

    公开(公告)号:CN111118120A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN202010082179.5

    申请日:2020-02-07

    IPC分类号: C12Q1/6834

    摘要: 本发明公开了一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行高灵敏度检测的液相色谱法,该检测方法包括:根据待检测的目标microRNA,设计荧光基团修饰的单链DNA,然后将其装载至磁珠表面作为检测探针;在上述检测探针中加入待检测的目标microRNA样品和DSN,充分混合,孵育;孵育后,将磁珠和未反应的DNA探针完全去除,得分离液;将分离液注入到液相色谱系统进行分离和定量。相对于现有技术,本发明方法利用液相色谱实现了对多种miRNA的同时检测,以miRNA-155和miRNA-21为例,该法对两者的检测限分别为0.33fM和0.24fM,线性范围均为1.0fM至10pM。所建立的方法能够成功应用于检测红斑狼疮、宫颈癌、卵巢癌患者和健康人血清样本中的miRNA-155和miRNA-21,以及更多种microRNA样品的检测。

    DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法

    公开(公告)号:CN112359094B

    公开(公告)日:2024-05-10

    申请号:CN202010729287.7

    申请日:2020-07-27

    IPC分类号: C12Q1/682

    摘要: 本发明公开了一种DNA/Fe3O4网状结构结合磁性三相萃取法的核酸检测方法,包括以下步骤:(1)制备Fe3O4纳米片;(2)在Fe3O4纳米片上修饰单链DNA得到Fe3O4/ssDNA;(3)制备超支化DNA结构样品,将超支化DNA结构样品与Fe3O4/ssDNA混合反应,得到DNA/Fe3O4网状结构;(4)将DNA/Fe3O4网状结构所在体系作为水相,和有机相混合,将带有萃取液滴的磁性棒浸入有机相,萃取DNA/Fe3O4网状结构后取出,利用紫外‑可见光谱仪对发生催化显色反应的液滴进行监测,分析紫外‑可见光谱数据即得待测样品中目标核酸的含量。该方法大大降低了核酸的检出限,实用性高,对于microRNA‑122的检出限低至0.147aM,对H‑DNA的检出限低至0.34aM,线性范围分别为0.5aM至1pM以及1aM至1pM(r2>0.995),利用单滴微萃取技术,检测效率高,操作简单,成本低。

    一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行检测的液相色谱法

    公开(公告)号:CN111118120B

    公开(公告)日:2022-09-23

    申请号:CN202010082179.5

    申请日:2020-02-07

    IPC分类号: C12Q1/6834

    摘要: 本发明公开了一种基于DSN循环扩增技术对多种microRNA同时进行高灵敏度检测的液相色谱法,该检测方法包括:根据待检测的目标microRNA,设计荧光基团修饰的单链DNA,然后将其装载至磁珠表面作为检测探针;在上述检测探针中加入待检测的目标microRNA样品和DSN,充分混合,孵育;孵育后,将磁珠和未反应的DNA探针完全去除,得分离液;将分离液注入到液相色谱系统进行分离和定量。相对于现有技术,本发明方法利用液相色谱实现了对多种miRNA的同时检测,以miRNA‑155和miRNA‑21为例,该法对两者的检测限分别为0.33fM和0.24fM,线性范围均为1.0fM至10pM。所建立的方法能够成功应用于检测红斑狼疮、宫颈癌、卵巢癌患者和健康人血清样本中的miRNA‑155和miRNA‑21,以及更多种microRNA样品的检测。

    一种核酸级联放大诱导三维纳米结构形成检测氯霉素的方法

    公开(公告)号:CN113322307A

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN202110565131.4

    申请日:2021-05-24

    IPC分类号: C12Q1/682

    摘要: 本发明公开了一种核酸级联放大诱导三维纳米结构形成检测氯霉素的方法。属于生物工程技术领域,本发明根据Ni‑Fe LDO纳米片(NSs)和无酶扩增方法研发出了检测氯霉素(CAP)的超灵敏比色测定法;由于G‑四链体被Ni‑Fe LDO NSs表面吸附,其类过氧化物酶催化活性得到增强;而且通过磁分离的效果,其信号背景值被有效地降低;本发明产生用于目标CAP定量检测的超灵敏信号;其在最佳条件下,可显示出0.1fM至0.1nM的宽线性范围,具有良好的线性(r2=0.998),其检测限(LOD)为11.6aM;此外,本发明还具有高特异性和稳定性的优点,方便应用于牛奶样品中目标CAP的定量检测。

    一种基于金银纳米星“尖峰暴露”检测抗生素的方法

    公开(公告)号:CN113218939A

    公开(公告)日:2021-08-06

    申请号:CN202110440402.3

    申请日:2021-04-23

    摘要: 本发明公开了一种基于金银纳米星“尖峰暴露”检测抗生素的方法。属于生物检测技术领域,具体步骤:Ni‑Fe LDOs的制备;将单链DNA和Ni‑Fe LDOs混合;得到修饰有单链DNA的Ni‑Fe LDOs;合成金纳米星材料,将银包覆其表面,得到金银纳米星材料;将其他DNA链加入到待检测的抗生素样本中,混合孵育;得到含有DNA/Ni‑Fe LDOs复合材料的混合溶液;加入双氧水、TMB、浓盐酸及金银纳米星材料,最后对信号进行记录。本发明包括CHA、HCR和磁分离这三种,具有成本低、灵敏度高及操作简单等优势;另外,本发明在食品质量控制、药物质量检测和体内抗生素残留分析等领域具有潜在的应用价值。