公开(公告)号：CN110734962A

公开(公告)日：2020-01-31

申请号：CN201911078391.8

申请日：2019-11-06

Applicant: 江苏开放大学(江苏城市职业学院)

Inventor： 秦品珠 ,  孔金明 ,  李海云 ,  潘俊晶 ,  孙婉铭 ,  周旋

IPC: C12Q1/6834 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种基于核酸适配体检测食品毒素的方法，包括以下步骤：1)将带凹槽的玻片进行清洗后，对玻片表面进行氨基硅烷化、醛基化修饰；2)将捕获探针capture DNA固定到醛基化玻片上；3)加入NPS-aptamer，滴加10.0μL 3×SSC缓冲液，将其放入振荡培养箱中30-45℃杂交25-40min；4)在玻璃凹槽中加入食品毒素溶液，45℃反应20min；5)将反应液转移至PCR管，加入H2O2和TMB溶液，808nm波长的光照10s-25min，温度计测定溶液温度变化；6)建立温度的变化和食品毒素加入量的拟合曲线图，实现食品毒素的测定。本发明操作简便，选择性好，无需使用昂贵的仪器。

公开(公告)号：CN110734962B

公开(公告)日：2021-10-19

申请号：CN201911078391.8

申请日：2019-11-06

Applicant: 江苏开放大学(江苏城市职业学院)

Inventor： 秦品珠 ,  孔金明 ,  李海云 ,  潘俊晶 ,  孙婉铭 ,  周旋

IPC: C12Q1/6834 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种基于核酸适配体检测食品毒素的方法，包括以下步骤：1)将带凹槽的玻片进行清洗后，对玻片表面进行氨基硅烷化、醛基化修饰；2)将捕获探针capture DNA固定到醛基化玻片上；3)加入NPS‑aptamer，滴加10.0μL 3×SSC缓冲液，将其放入振荡培养箱中30‑45℃杂交25‑40min；4)在玻璃凹槽中加入食品毒素溶液，45℃反应20min；5)将反应液转移至PCR管，加入H2O2和TMB溶液，808nm波长的光照10s‑25min，温度计测定溶液温度变化；6)建立温度的变化和食品毒素加入量的拟合曲线图，实现食品毒素的测定。本发明操作简便，选择性好，无需使用昂贵的仪器。