公开(公告)号：CN101663997A

公开(公告)日：2010-03-10

申请号：CN200910034976.X

申请日：2009-09-16

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  王永平 ,  周道宏 ,  师尚礼 ,  王小春 ,  汤容娣

IPC: A01H4/00 ,  C05G1/00

Abstract: 本发明公开了一种克服三叶草品种基因型障碍高频体胚再生培养方法，包括(1)选材：三叶草成熟种子经冲洗、消毒杀菌、干燥后选取无菌苗的上胚轴、下胚轴和再生植株叶片三种外植体；(2)将上述选取的外植体接种于胚发生愈伤组织诱导培养基上培养；(3)将上述经胚发生愈伤组织诱导培养后的外植体接种于胚继代形成培养基上培养；(4)将上述经胚继代形成培养后的外植体接种于胚成熟萌发成苗培养基上培养形成幼苗；(5)壮苗生根培养；(6)再生植株移栽、成活。本发明可有效地克服三叶草高频体胚再生培养中不同品种及基因型障碍问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。

公开(公告)号：CN101861831A

公开(公告)日：2010-10-20

申请号：CN200910034975.5

申请日：2009-09-16

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  师尚礼 ,  鲍容静 ,  王永平 ,  王小春 ,  汤容娣

IPC: A01H4/00 ,  C05G1/00

Abstract: 本发明公开了一种克服三叶草品种基因型障碍高频体胚再生培养基，包括幼苗生长驯化培养基、胚发生愈伤组织诱导培养基、胚继代形成培养基和胚成熟萌发成苗培养基，幼苗生长驯化培养基为：1/2改良MS+20g/L白糖+0.7％琼脂；胚发生愈伤组织诱导培养基为：改良SH+8～12mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+0.3％phytagel；胚继代形成培养基为：改良SH+2～8mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L 6-BA+50g/L蔗糖+0.35％phytagel；胚成熟萌发成苗培养基为：改良MS+30g/L白糖+0.7％琼脂。本发明可有效地克服三叶草高频体胚再生培养中不同品种及基因型障碍问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。

公开(公告)号：CN101861831B

公开(公告)日：2012-06-20

申请号：CN200910034975.5

申请日：2009-09-16

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  师尚礼 ,  鲍容静 ,  王永平 ,  王小春 ,  汤容娣

IPC: A01H4/00 ,  C05G1/00

Abstract: 本发明公开了一种克服三叶草品种基因型障碍高频体胚再生培养基，包括幼苗生长驯化培养基、胚发生愈伤组织诱导培养基、胚继代形成培养基和胚成熟萌发成苗培养基，幼苗生长驯化培养基为：1/2改良MS+20g/L白糖+0.7％琼脂；胚发生愈伤组织诱导培养基为：改良SH+8～12mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+0.3％phytagel；胚继代形成培养基为：改良SH+2～8mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L 6-BA+50g/L蔗糖+0.35％phytagel；胚成熟萌发成苗培养基为：改良MS+30g/L白糖+0.7％琼脂。本发明可有效地克服三叶草高频体胚再生培养中不同品种及基因型障碍问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。

公开(公告)号：CN101663997B

公开(公告)日：2011-11-09

申请号：CN200910034976.X

申请日：2009-09-16

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  王永平 ,  周道宏 ,  师尚礼 ,  王小春 ,  汤容娣

IPC: A01H4/00 ,  C05G1/00

Abstract: 本发明公开了一种克服三叶草品种基因型障碍高频体胚再生培养方法，包括(1)选材：三叶草成熟种子经冲洗、消毒杀菌、干燥后选取无菌苗的上胚轴、下胚轴和再生植株叶片三种外植体；(2)将上述选取的外植体接种于胚发生愈伤组织诱导培养基上培养；(3)将上述经胚发生愈伤组织诱导培养后的外植体接种于胚继代形成培养基上培养；(4)将上述经胚继代形成培养后的外植体接种于胚成熟萌发成苗培养基上培养形成幼苗；(5)壮苗生根培养；(6)再生植株移栽、成活。本发明可有效地克服三叶草高频体胚再生培养中不同品种及基因型障碍问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。