公开(公告)号：CN108056023A

公开(公告)日：2018-05-22

申请号：CN201810116768.3

申请日：2018-02-06

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  胡德龙 ,  韩鹏 ,  刘艳 ,  周兴元 ,  夏阳 ,  李金涛

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了无种质基因型限制高频体胚再生培养方法，包括以下步骤：1）选材及无菌芽苗的生长驯化培养；2）叶芽原基体细胞胚诱导的发生培养；3）胚状体增殖和生长培养；4）丛生芽的成苗快繁培养；5）壮苗生根培养；6）再生植株移栽及成活。本发明还公开了一种结缕草的高频体胚再生培养培养方法。本发明通过选择合适外植体、及依据外植体关键发育阶段及时调整培养基配方和激素成分浓度、及相应培养条件等，使这些因素达到良好相互协同作用，有效地克服了结缕草培养中不同种（品种）及基因型限制问题及高频体胚再生问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率。

公开(公告)号：CN101703002A

公开(公告)日：2010-05-12

申请号：CN200910213356.2

申请日：2009-11-03

Applicant: 江苏农林职业技术学院 ,  山东省林业科学研究院

Inventor： 梁慧敏 ,  夏阳 ,  燕丽萍 ,  王小春 ,  鲍荣静

IPC: A01H4/00 ,  C05G1/00

Abstract: 本发明公开了一种克服苜蓿品种基因型限制高频体胚再生培养基，包括幼苗生长驯化培养基、体细胞胚胎发生诱导培养基、胚继代形成培养基和胚成熟萌发成苗培养基，幼苗生长驯化培养基为1/2改良MS+20g/L白糖+0.7％琼脂；体细胞胚胎发生诱导培养基为改良SH+6～10mg/L2，4-D+0.2～0.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+0.3％phytagel；胚继代形成培养基为改良SH+2～5mg/L 2，4-D+0.2～0.5mg/L6-BA+500mg/L水解酪蛋白+50g/L蔗糖+0.35％phytagel；胚成熟萌发成苗培养基为改良MS+500mg/L水解酪蛋白+30g/L白糖+0.7％琼脂。本发明可有效地克服苜蓿高频体胚再生培养中不同品种及基因型限制问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高育种效率。

公开(公告)号：CN110547196B

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN201910903330.4

申请日：2019-09-23

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  李成龙 ,  韩鹏 ,  贾思振 ,  张文博 ,  张颖 ,  夏阳

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开一种通过叶组培快繁空气凤梨种苗的方法，包括如下步骤：1）空气凤梨叶外植体的采取；2）叶外植体的消毒灭菌；3）叶外植体丛生芽的诱导；4）芽苗的快繁分化培养；5）壮苗生根培养；7）无菌苗的炼苗移栽。本发明材料来源广泛，取材快捷方便，操作简单，繁殖系数高，种苗生长速度快，可在较短时间内快繁大量性状一致、生长一致且健壮的组培苗等优点，既解决了空气凤梨种子繁殖困难，后代有可能发生变异，不能保持母本优良性状的缺点，又解决了很多稀有种或品种只在花后才会产生稀少的子株，不能满足组培快繁全年采集外植体材料的现实问题。

公开(公告)号：CN112080575A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202010892496.3

申请日：2020-08-28

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  李晨龙 ,  贾思振 ,  张颖 ,  夏阳 ,  袁诗宇 ,  翟云菲

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11 ,  G16B40/00

Abstract: 本发明公开了一种引物对组合，本发明还公开了所述引物对组合在结缕草种质鉴别或品种鉴定或AFLP分子指纹图谱库的构建中的应用。本发明还公开了一种结缕草AFLP分子指纹图谱库的构建方法及其应用。本发明经过反复多次不懈的试验成功地筛选到能有效鉴别结缕草不同种质的选择性扩增引物及引物组合，高质量的DNA指纹图谱，不但具有扩增位点多、带型质量好、分辨率高、条带疏密合适及分布均匀，易精准地检测出样本的细微差异，从而为构建结缕草AFLP分子指纹图谱库奠定了技术基础；还通过提供的试剂方法8对引物组合等成功而有效的鉴别出90个不同种质结缕草，为今后结缕草种质鉴别、新品种登记、注册和产权保护等提供了科学依据。

公开(公告)号：CN108243960A

公开(公告)日：2018-07-06

申请号：CN201810117564.1

申请日：2018-02-06

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  刘艳 ,  韩鹏 ,  胡德龙 ,  周兴元 ,  夏阳 ,  吴璇

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种体细胞胚诱导培养基，包括改良MS培养基、2～4mg/L 2,4‑D、0.2mg/L NAA、0.1 mg/L 6‑BA、40g/L蔗糖、0.7%琼脂，pH值为5.8~6.0。本发明还公开了胚状体增殖生长组合培养基和无种质基因型限制高频体胚再生培养基。本发明还公开该体细胞胚诱导培养基和上述组合培养基的应用。本发明通过选择合适外植体、及依据外植体关键发育阶段及时调整培养基配方和激素成分浓度、及相应培养条件等，使这些因素达到良好相互协同作用，有效地克服了结缕草培养中不同种（品种）及基因型限制问题及高频体胚再生问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率。

公开(公告)号：CN102934613A

公开(公告)日：2013-02-20

申请号：CN201210500422.6

申请日：2012-11-30

Applicant: 山东省林业科学研究院 ,  江苏农林职业技术学院

Inventor： 燕丽萍 ,  梁慧敏 ,  夏阳 ,  刘翠兰 ,  毛秀红 ,  孙超

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种利用60Co r射线辐射诱变红叶石楠体细胞育种的方法，是以在愈伤组织增殖培养基上暗培养获得的红叶石楠胚性愈伤组织为辐射材料，用辐照剂量为15-45Gy的60Co r射线辐射对其处理1-2小时，然后将辐射处理后的愈伤组织转到愈伤组织分化培养基上，在温度为25±2℃条件下暗培养30-35天，之后转移到组培室光照条件下培养，愈伤组织绿芽分化率高达79%，由辐射诱变筛选的细胞再生出植株。本发明适宜用于植物新品种选育，为在细胞水平上开展植物体细胞突变体育种提供条件。

公开(公告)号：CN108056023B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201810116768.3

申请日：2018-02-06

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  梁栋 ,  胡德龙 ,  韩鹏 ,  刘艳 ,  周兴元 ,  夏阳 ,  李金涛

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了无种质基因型限制高频体胚再生培养方法，包括以下步骤：1）选材及无菌芽苗的生长驯化培养；2）叶芽原基体细胞胚诱导的发生培养；3）胚状体增殖和生长培养；4）丛生芽的成苗快繁培养；5）壮苗生根培养；6）再生植株移栽及成活。本发明还公开了一种结缕草的高频体胚再生培养培养方法。本发明通过选择合适外植体、及依据外植体关键发育阶段及时调整培养基配方和激素成分浓度、及相应培养条件等，使这些因素达到良好相互协同作用，有效地克服了结缕草培养中不同种（品种）及基因型限制问题及高频体胚再生问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率。

公开(公告)号：CN110547195A

公开(公告)日：2019-12-10

申请号：CN201910902614.1

申请日：2019-09-23

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 梁慧敏 ,  李成龙 ,  韩鹏 ,  梁栋 ,  夏阳 ,  贾思振 ,  李双云 ,  郭彩红

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开一种通过种子无菌萌发获得空气凤梨种苗的方法，包括如下步骤：1）选择空气凤梨种荚采集的时间；2）种荚的消毒灭菌；3）种荚的处理；4）丛生芽培养；5）芽增殖培养；6）壮苗生根培养；7）无菌苗的炼苗与移栽。本发明一种通过种子无菌萌发获得空气凤梨种苗的方法具有操作简单，种子萌发率高，繁殖系数较大，种苗生长健壮整齐一致，生长速度快，移栽种苗室外成活率高，有利于大规模工厂化生产等优点。

公开(公告)号：CN102124954B

公开(公告)日：2012-11-28

申请号：CN201110033598.0

申请日：2011-01-31

Applicant: 江苏农林职业技术学院 ,  山东省林业科学研究院

Inventor： 梁慧敏 ,  刘翠兰 ,  颜志明 ,  夏阳 ,  燕丽萍 ,  朱晓花 ,  方敏彦 ,  董慧

IPC: C12N5/04 ,  A01H4/00

Abstract: 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基包括芽启动培养基、试管苗增殖培养基、第一诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第二诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第三诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第一体胚和/或不定芽生长与分化培养基、第二体胚和/或不定芽生长与分化培养基和壮苗生根培养基。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基通过改良基本培养基及成分、调整培养条件，使繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚发生途径快繁，植株移栽成活率达到95%以上，种苗生长健壮，可有效解决优良种苗种质退化问题，也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木，还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。

公开(公告)号：CN102124955A

公开(公告)日：2011-07-20

申请号：CN201110033701.1

申请日：2011-01-31

Applicant: 江苏农林职业技术学院 ,  山东省林业科学研究院

Inventor： 梁慧敏 ,  夏阳 ,  燕丽萍 ,  朱晓花 ,  李双云 ,  刘翠兰 ,  刘艳 ,  刘进华

IPC: A01H4/00

Abstract: 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法，包括以下步骤：（1）建立红叶石楠无菌试管苗再生体系；（2）建立离体叶片体胚和不定芽诱导的高频快繁体系；（3）试管苗生根炼苗移栽。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法通过选择适宜外植体、改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，使种子繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚胎发生途径快繁，并使得植株移栽成活率达到95%以上，种苗生长健壮，可有效解决优良种苗种质退化问题，也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木，此外，还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。